基于转录组和代谢组联合分析三种山茶属花卉颜色变异分子机制的研究

【字体: 时间:2025年05月20日 来源:Plant Growth Regulation 3.5

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  为解析山茶属花卉颜色变异的分子机制,研究人员对红花(RD)、黄花(YE)、白花(WH)山茶开展转录组与代谢组联合分析。发现不同花色中花青素、黄酮类代谢物含量差异显著,筛选出 PAL、CHS 等关键结构基因及 MYB、bHLH 等转录因子(TFs),为山茶花色育种提供理论依据。

  
山茶是我国传统观赏花木,其花色丰富多样却缺乏对颜色变异分子机制的深入解析。目前,关于山茶属花卉颜色形成的调控网络,尤其是关键基因与代谢物的互作关系尚不明确。阐明花色变异的分子基础,不仅能提升山茶的观赏价值,还可为园艺植物花色育种提供理论支撑。为此,重庆市园林科研院与仲恺农业工程学院的研究人员合作,针对红花山茶(Camellia amplexicaulis Cohen Stuart,RD)、黄花山茶(C. petelotii (Merr.) Sealy,YE)和白花油茶(C. oleifera Abel,WH)开展了系统研究,相关成果发表在《Plant Growth Regulation》。

研究采用转录组测序(RNA-seq)和超高效液相色谱 - 质谱 / 质谱(UPLC-MS/MS)靶向代谢组技术,结合生物信息学分析,探究不同花色山茶花瓣中基因表达与代谢物积累的关联。实验材料取自仲恺农业工程学院白云校区木本花卉资源园,分别采集三种山茶盛花期花瓣,设置三个生物学重复。

代谢物积累差异与花色表型关联


通过代谢组分析,在三种花瓣中检测到 783 种代谢物,其中 682 种为黄酮类化合物,包括黄酮醇(216 种)、黄酮(187 种)、花青素(44 种)等。红花(RD)中花青素含量最高(22.64 mmol/g),且天竺葵素、矢车菊素等衍生物富集;黄花(YE)的芹菜素、牡荆素及其衍生物,以及槲皮素衍生物含量显著高于其他花色;白花(WH)则以山奈酚及其衍生物为主。主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)显示,不同花色的代谢物轮廓差异显著,筛选出 702 个差异代谢物(DAMs),主要富集于类黄酮生物合成(ko00941)、花青素生物合成(ko00942)等通路。

转录组揭示关键结构基因与转录因子


转录组测序共获得 60.56 Gb 清洁数据,鉴定出 28,568 个差异表达基因(DEGs)。在类黄酮合成通路中,筛选出 139 个结构基因,包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、花青素合成酶(ANS)等。其中,29 个关键基因(如 PAL、4CL、CHI、CHS、ANS、ANR、LAR、CYP75B1、FLS 等)的表达模式与黄酮类代谢物积累高度相关。例如,CHS 和 ANS 在红花中高表达,与花青素合成直接相关;FLS 在白花中高表达,促进山奈酚衍生物生成。
转录因子分析显示,3,181 个 TFs 中,MYB、bHLH、bZIP、WRKY 家族在黄酮类和花青素合成通路中起关键调控作用。66 个 TFs 与总黄酮和花青素含量高度相关,如 bHLH 和 MYB 家族成员促进花青素积累,而部分 WRKY 家族成员可能抑制花青素合成。

多组学联合构建调控网络


通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)和相关性分析,构建了 “结构基因 - 代谢物 - TFs” 调控网络。结果表明,结构基因通过催化黄酮类代谢物的合成路径直接影响花色,如 CHS 催化生成查尔酮,ANS 催化无色花青素转化为有色花青素;TFs 则通过调控结构基因表达间接作用,如 MYB-bHLH-WD40 复合物激活花青素合成基因。此外,YE 中特有的 C12RT1 基因与芹菜素衍生物积累正相关,WH 中的 FG3 基因与山奈酚糖苷合成相关。

研究结论与意义


本研究通过转录组与代谢组联合分析,揭示了山茶花色变异的分子机制:红花主要依赖花青素的高度积累,黄花由芹菜素、槲皮素及其衍生物主导,白花则与山奈酚衍生物相关。鉴定出的 29 个关键结构基因和 66 个 TFs,为解析花色调控网络提供了靶点。研究结果不仅丰富了山茶属植物花色形成的理论体系,也为通过基因编辑(如调控 ANS、CHS 等)或分子标记辅助育种培育新花色品种奠定了基础,对提升山茶的园艺价值和经济潜力具有重要意义。

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