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针对创伤性脊髓损伤（SCI）后胶质瘢痕中软骨素硫酸蛋白聚糖（CSPGs）释放机制不明的问题，研究人员探讨 Rab27a 介导的细胞外囊泡（EVs）释放作用。发现 Rab27a 通过 Rho/ROCK 通路促进 CSPG 释放，其 siRNA 可改善功能恢复，为 SCI 治疗提供新靶点。
脊髓损伤如同横亘在神经修复之路上的 “天堑”，每年全球约 18 万新发患者因神经再生障碍面临长期功能瘫痪。创伤后形成的胶质瘢痕恰似一道密不透风的 “屏障”，其核心成分软骨素硫酸蛋白聚糖（CSPG）由星形胶质细胞分泌，持续抑制轴突生长。然而，CSPG 如何突破细胞界限、在瘢痕中聚积的机制长期成谜。在此背景下，印度国家制药教育与研究学院（NIPER-Ahmedabad）的研究团队聚焦于细胞外囊泡（EVs）这一细胞间通讯的 “信使”，探寻 Rab27a 蛋白在脊髓损伤后胶质瘢痕形成中的关键作用，相关成果发表于《Biomaterials Advances》。
研究人员主要采用了细胞培养、EVs 分离、RNA 干扰（siRNA）、免疫组织化学染色、动物模型（大鼠脊髓挫伤模型）等技术方法，并使用 CD9、Alix、TSG101 等标志物验证 EVs 释放，通过大鼠样本队列分析不同时间点的蛋白表达变化。
Rab27a 在炎症刺激下的表达特征
在 C6 胶质细胞系中，干扰素 -γ（IFN-γ，100 ng/ml）、肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）和脂多糖（LPS）等炎症刺激均能显著上调 Rab27a 表达，其中 IFN-γ 诱导作用最强（约 5.8 倍）。在大鼠脊髓挫伤模型中，损伤后 1-28 天（DPI）均检测到 Rab27a 持续表达，提示其在急性、亚急性及慢性期的全程参与。
Rab27a 介导 EVs 释放及对神经元生长的调控
通过 GFP 标记的 Rab27a 质粒转染和 Rab27a-siRNA 处理，证实 Rab27a 可通过促进多囊泡体（MVBs）与细胞膜的锚定融合，释放富含 CD9、Alix、TSG101 标志物的 EVs。功能实验显示，Rab27a 过表达细胞来源的 EVs 显著抑制 Neuro2a（N2A）神经元细胞生长，而 Rab27a-siRNA 处理的 EVs 则促进神经元突起生长，揭示 Rab27a 通过 EVs 传递促神经退行信号。
Rab27a-EVs 与 CSPG 的协同作用机制
免疫组织化学染色发现，脊髓损伤组织中 Rab27a 与胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞标志物）、CSPG 及 EVs 标志物 CD9 存在共定位，证实星形胶质细胞通过 Rab27a 释放含 CSPG 的 EVs。进一步机制研究表明，Rab27a 过表达可通过 Rho/ROCK 通路上调 CSPG 表达，并伴随 pAkt（磷酸化蛋白激酶 B）水平降低和 β-tubulinIII（神经元微管蛋白标志物）减少，提示该通路在神经退行中的核心作用。
Rab27a-siRNA 对脊髓损伤功能恢复的改善
在大鼠脊髓挫伤模型中，沉默 Rab27a 表达可显著促进神经功能恢复，印证抑制 Rab27a-EVs 释放对胶质瘢痕形成的干预效果。该研究首次明确 Rab27a 作为星形胶质细胞释放 CSPG-EVs 的关键调控因子，揭示其通过 EVs 介导的细胞间通讯在脊髓损伤后瘢痕形成中的双重作用 —— 既是 EVs 释放的 “开关”，也是 CSPG 促炎促瘢痕效应的 “放大器”。研究结果不仅填补了 CSPG 分泌机制的空白，更提供了靶向 Rab27a 以阻断 EVs-CSPG 轴的治疗策略，为开发脊髓损伤后神经修复的新型干预手段开辟了道路。未来研究可进一步探索 Rab27a 与其他 Rab 家族蛋白的协同调控网络，以及长期抑制 Rab27a 对神经可塑性的潜在影响，为临床转化奠定更坚实的理论基础。
