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为解决豌豆蛋白分离物(PPI)中抗营养因子(ANFs)影响营养吸收的问题,研究人员探究了高压处理(HPP)、超声(US)和水力空化(HDC)对 ANFs 的影响。发现 HDC 降胰蛋白酶抑制活性(TIA)最显著,HPP 预处理提升蛋白回收率,为优化豌豆蛋白加工提供依据。
豌豆作为重要的植物蛋白来源,富含优质蛋白及多种微量元素,但其蛋白分离物(PPI)中普遍存在胰蛋白酶抑制剂(TI)、植酸、单宁等抗营养因子(ANFs)。这些因子会与营养物质结合,降低消化吸收率,甚至引发健康问题。尽管部分 ANFs 如单宁、植酸具有抗氧化等潜在益处,但其负面效应仍需通过加工技术加以调控。传统提取方法如搅拌提取(CE)虽能部分降低 ANFs,但效率有限,且可能伴随蛋白损失。因此,开发高效、环保的新型加工技术以平衡 ANFs 控制与蛋白保留,成为提升豌豆蛋白营养价值的关键挑战。
爱尔兰橡树公园实验研究农场的研究人员开展了相关研究,旨在评估高压处理(HPP)、超声(US,20 kHz)和水力空化(HDC,50 次通过)等先进技术在豌豆蛋白提取中对 ANFs 的影响,并与传统方法对比。研究成果发表在《Food Chemistry》。
研究主要采用以下技术方法:
- 蛋白提取技术:包括传统搅拌提取(CE)、超声辅助提取(US,1000 W,30 min)、水力空化提取(HDC,50 次通过),以及 HPP 预处理(200、300、400 MPa,3 min)后结合 CE 提取。
- 分析方法:测定胰蛋白酶抑制活性(TIA)、植酸和单宁含量,计算蛋白回收率及提取产率,采用单因素方差分析(ANOVA)和 Tukey 检验进行统计分析。
3.1 无预处理提取技术对 ANFs 的影响
- TIA reduction:HDC 提取的 PPI 中 TIA 降低 66.09%,显著优于 US(48.69%)和 CE(37.50%)。残基分析表明,HDC 通过更强的空化效应破坏 TI 结构,而非简单转移至残基。
- 植酸含量:所有方法提取的 PPI 植酸含量均高于原料,可能因碱性条件下植酸溶解及蛋白富集效应。HDC 和商业样品(Cm)植酸水平相近,CE 最低。
- 单宁含量:CE 降低单宁 75.59%,效果最佳;US 和 HDC 分别降低 51.17% 和 47.49%。单宁可能通过形成蛋白 - 单宁复合物或氧化作用被去除,CE 的温和条件更利于单宁溶解于上清液而被去除。
3.2 HPP 预处理对 ANFs 的影响
- 蛋白回收:HPP 200 MPa 预处理结合 CE 的蛋白回收率达 72.74%,蛋白含量 86.95%,显著高于 CE 和 Cm,表明 HPP 可增强细胞破碎,提升蛋白释放效率。
- TIA reduction:HPP 400 MPa 预处理使 TIA 降低 44.41%,接近 Cm 水平。高压破坏 TI 与胰蛋白酶的非共价相互作用,减少抑制活性。
- 植酸与单宁:HPP 预处理未显著降低植酸,其增加趋势与无预处理组一致;单宁降低约 48.7%,低于 CE,可能因 HPP 促进蛋白 - 单宁复合物形成并保留在蛋白相中。
3.3 ANF 减少对蛋白消化率的影响
TIA 降低直接提升蛋白消化率,HDC 和 HPP 通过结构破坏增强蛋白酶可及性。植酸虽未有效降低,但结合酶处理(如植酸酶)或优化 pH 有望改善。单宁的适度保留可能平衡抗氧化活性与消化率,但需关注其氧化产物对蛋白功能的潜在影响。
结论与意义:
- 技术有效性:HDC 在降低 TIA 方面表现最优,HPP 预处理显著提升蛋白回收率,CE 对单宁去除效果最佳。
- 工业应用潜力:HDC 和 HPP 可集成到现有加工流程,减少 ANFs 的同时优化蛋白产量,为豌豆蛋白工业化生产提供技术参考。
- 研究局限与展望:植酸管理仍需探索非碱性提取条件或联合酶处理;未来可结合体外消化模型验证 ANFs 减少对营养生物利用度的实际影响。
该研究系统揭示了新型加工技术对豌豆蛋白 ANFs 的调控机制,为开发高附加值植物蛋白产品、推动可持续蛋白资源利用提供了理论与技术支撑。