HHLA2通过激活c-Met通路驱动肝癌进展并作为靶向治疗生物标志物的机制研究

本研究针对肝癌(HCC)治疗中c-Met抑制剂疗效预测难题，揭示了免疫检查点分子HHLA2通过糖基化依赖方式激活c-Met的非经典通路，促进MMP9/VEGFA表达从而驱动肿瘤进展。研究人员通过多组学分析、患者队列验证及PDOs模型证实，血清HHLA2水平可预测c-Met抑制剂敏感性，为肝癌精准治疗提供新型液体活检标志物和联合治疗靶点。

　　

肝癌作为全球高发恶性肿瘤，治疗困境始终困扰着临床医生。尽管c-Met靶向药物曾被寄予厚望，但两项关键III期临床试验(tivantinib)的失败暴露出重大瓶颈——约50%存在c-Met异常的患者对治疗无反应，说明传统基于组织c-Met过表达的检测方法存在严重缺陷。这背后隐藏着两个科学谜题：c-Met是否存在不依赖HGF的激活机制？能否找到更精准的生物标志物来识别真正"c-Met成瘾"的肿瘤？

来自广州医科大学附属肿瘤医院等机构的研究团队将目光投向B7家族新成员HHLA2。这个源于人类内源性逆转录病毒的免疫调节分子，在肺癌、胃癌中已显示出促癌潜力，但其在肝癌中的功能机制仍是未解之谜。通过整合TCGA数据库分析和176例临床样本验证，研究人员首先发现HHLA2在晚期肝癌中异常高表达，且与血管侵犯、高复发率显著相关，提示其可能参与肿瘤恶性进展。这项突破性研究成果发表在《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》上。

研究团队运用了多项关键技术：基于广东和上海两地247例肝癌患者的临床队列分析；质谱联用(LC-MS/MS)和分裂荧光素酶系统鉴定HHLA2-c-Met相互作用；NRAS^V12/AKT1驱动的HDTVi小鼠模型模拟肝癌演进；5例患者来源类器官(PDOs)进行药物敏感性测试。这些方法从分子机制到临床转化形成了完整证据链。

【Elevated HHLA2表达与肝癌不良预后相关】
通过分析TCGA-LIHC和广东176例患者样本，发现HHLA2 mRNA和蛋白水平在肝癌组织显著升高，且高表达患者中位生存期缩短40%。体外实验显示，过表达HHLA2的HepG2细胞增殖速率提高2.1倍，Transwell侵袭细胞数增加3.8倍，提示其促转移特性。

【HHLA2通过糖基化依赖方式激活c-Met】
质谱分析意外捕获到HHLA2与c-Met的相互作用，分裂荧光素酶实验证实其胞外结构域直接结合。关键发现是：HHLA2能维持c-Met在膜上的稳定存在，使Y1235位点磷酸化水平持续升高，这种激活不依赖HGF且需要STT3介导的N-糖基化修饰。在LO2肝细胞中，kinase-dead c-Met(Y1234/1235F)可完全阻断HHLA2促癌效应。

【MMP9/VEGFA介导促转移和血管生成】
转录组分析揭示HHLA2过表达上调MMP9(4.2倍)和VEGFA(3.5倍)。功能实验显示：MMP9敲除使HepG2-HHLA2细胞侵袭能力下降72%；而VEGFA中和抗体可消除HHLA2诱导的HUVEC管形成。小鼠模型中，HHLA2过表达使CD34⁺微血管密度增加2.3倍，肺转移结节数提高4.1倍。

【血清HHLA2预测c-Met抑制剂敏感性】
上海71例患者队列显示，HHLA2高表达组p-Met阳性率达81.4%。突破性发现在于：13例患者血清HHLA2水平与组织表达高度一致(r=0.82)。PDOs实验证实，高HHLA2组对PHA665752的敏感性提高3.7倍，LDH释放量增加2.9倍，提示其可作为液体活检标志物。

这项研究首次阐明HHLA2通过"配体非依赖"方式激活c-Met的新机制，解决了c-Met抑制剂临床应用的两大难题：发现替代HGF的激活途径，提供血清可检测的预测标志物。特别值得注意的是，虽然HHLA2是免疫检查点分子，但在NRAS^V12/AKT1小鼠模型中，其促瘤作用主要源于直接激活肿瘤细胞c-Met信号，仅选择性抑制NK细胞浸润，这为联合免疫治疗提供新思路。

临床转化方面，研究提出"HHLA2-c-Met"轴双重靶向策略：针对HHLA2高表达患者，采用c-Met抑制剂联合抗血管生成药可能获得协同效应；监测血清HHLA2动态变化可实时评估疗效。该成果不仅为肝癌精准治疗开辟新途径，其揭示的"免疫分子直接调控激酶"机制也可能适用于其他癌症类型。