犬 Vector-Borne 病原体传播速度的体外实验研究：揭示 Ehrlichia canis、Anaplasma phagocytophilum 和 Borrelia burgdorferi s.s. 的传播动力学

犬媒介传播疾病（CVBDs）威胁公共卫生与犬健康。为明确蜱传病原体（TBPs）传播时间，研究人员利用连续流体外喂养系统（CFIFS），探究犬埃立克体（E. canis）、嗜吞噬细胞无形体（A. phagocytophilum）和伯氏疏螺旋体（B. burgdorferi s.s.）的传播速度（SOT）。发现三者 SOT 分别为 3-6 h、12-15 h、42-45 h（血液）/3-6 h（膜拭子），为防控提供关键数据。

　　

蜱虫，这种看似微小的节肢动物，却是众多致命病原体的 “搬运工”。由其传播的犬媒介传播疾病（Canine Vector-Borne Diseases, CVBDs）如犬埃立克体病、无形体病和莱姆病等，不仅严重威胁犬类健康，部分病原体（如嗜吞噬细胞无形体 Anaplasma phagocytophilum、伯氏疏螺旋体 Borrelia burgdorferi s.s.）还具有人畜共患潜力，给公共卫生带来巨大挑战。然而，长期以来，关于这些病原体通过蜱虫传播的具体时间动力学机制，科学界仍存在诸多空白。例如，不同病原体在蜱虫附着宿主后多久开始传播？传播速度是否因蜱种或病原体种类而异？这些关键问题的答案，直接关系到能否制定出精准的防控策略，如选择何种时效的杀蜱剂阻断传播。

为填补这一知识缺口，来自法国勃林格殷格翰动物健康公司（Boehringer Ingelheim Animal Health）等机构的研究团队，开展了一项针对犬类主要蜱传病原体传播速度（Speed of Transmission, SOT）的系统性研究。相关成果发表在《Parasites & Vectors》杂志，为理解蜱 - 病原体 - 宿主互作机制提供了重要突破。

研究技术方法

研究采用经改良的美国农业部（USDA）连续流体外喂养系统（Continuous-Flow In Vitro Feeding System, CFIFS），构建三种蜱 - 病原体模型：

1. 感染犬埃立克体（Ehrlichia canis）的血红扇头蜱（Rhipicephalus sanguineus，感染率 18.3%）；
2. 感染嗜吞噬细胞无形体（A. phagocytophilum）的蓖麻硬蜱（Ixodes ricinus，感染率 56%）；
3. 感染伯氏疏螺旋体（B. burgdorferi s.s.）的蓖麻硬蜱（I. ricinus，感染率 76%）。
   每个系统使用 58-60 只实验室饲养蜱虫，设置 4-6 个重复。通过每 3 小时采集血液样本、每 6 小时采集喂养膜拭子样本，结合定量 PCR（qPCR）检测病原体动态，同步监测蜱虫附着率（如 3 小时开始附着）和存活率。

研究结果

1. 蜱虫附着动力学

• 所有蜱虫均在接入系统 3 小时后开始附着。
• 血红扇头蜱在 57 小时时附着率达峰值（89.7%）；感染 A. phagocytophilum 的蓖麻硬蜱在 51 小时附着率为 4-30%；感染 B. burgdorferi s.s. 的蓖麻硬蜱在 48 小时附着率为 6.3-47.9%。

2. 病原体传播速度（SOT）

• 犬埃立克体（E. canis）：血液中首次检测到病原体的时间为蜱附着后 6 小时（即接入系统 9 小时），结合 3 小时检测间隔，推断 SOT 为 3-6 小时。
• 嗜吞噬细胞无形1体（A. phagocytophilum）：血液中首次检测时间为蜱附着后 15 小时（接入系统 18 小时），SOT 为 12-15 小时。
• 伯氏疏螺旋体（1B. burgdorferi s.s.）：血液中首次检测时间为蜱附着后 45 小时（接入系统 48 小时），但喂养膜拭子在蜱附着后 3 小时即可检测到病原体，提示其在蜱唾液腺中的释放早于血液传播，SOT 存在双相特征（膜表面 3-6 小时，血液 42-45 小时）。

3. 蜱虫1存活与摄血特征

• 血红扇头蜱死亡率较低（72 小时最高 13.3%），雌雄蜱体重分别增加 19% 和 19.7%，表明摄血充分。
• 蓖麻硬蜱感染 A. phagocytophilum 组死亡率较高（72 小时达 42.5%），但雌蜱体重增加 21%；感染 B. burgdorferi s.s. 组后期死亡率激增（72 小时达 95.1%），可能与高感染负荷相关。

研究结论与讨论

本研究通过标准化体外模型，首次直接比较三种重要犬蜱传病原体的传播时间，证实：

1. 传播速度差异显著：E. canis 传播最快（3-6 小时），A. phagocytophilum 次之（12-15 小时），B. burgdorferi s.s. 最慢（血液传播需 42-45 小时），但膜拭子检测显示其早期唾液释放可能加速局部传播风险。
2. 防控策略启示：杀蜱剂的 “杀蜱速度” 需匹配病原体 SOT。例如，针对 E. canis 需速效（<6 小时）杀蜱或驱避剂，而针对 B. burgdorferi s.s.，48 小时内起效的药物（如 afoxolaner、sarolaner）即可有效阻断传播。
3. 模型价值3：CFIFS 系统避免了体内实验的伦理限制，可标准化模拟蜱 - 血源互作，为后续研究巴贝斯虫（Babesia spp.）等其他病原体提供了通用平台。

研究同时指出，体外模型未纳入宿主免疫应答，可能低估实际传播复杂性。但通过与前期体内数据（如 E. canis 在犬体内 3 小时传播）的一致性，证实了该模型的可靠性。这些发2现为开发 “传播阻断型” 驱虫药奠定了理论基础，未来可进一步推动以病原体 SOT 为靶点的精准防控策略，助力全球 CVBDs 防控。