下一代测序在子宫内膜癌分子分型中优于 ProMisE（Proactive Molecular Risk Classifier for Endometrial Cancer）的应用研究

为解决子宫内膜癌（EC）风险分层难题，研究人员对比下一代测序（NGS）与 ProMisE 在分子分型中的价值。对 200 例 EC 进行 145 癌基因检测及免疫组化分析，发现 NGS 分型的四亚型总生存差异显著（p=0.006），凸显 NGS 在精准分层和预后评估中的优势。

　　子宫内膜癌（Endometrial Cancer, EC）作为全球女性第六大常见癌症，每年新增病例超 40 万，且发病率和死亡率呈上升趋势。当前，尽管组织学亚型、肿瘤分级、FIGO 分期等传统病理指标是指导治疗的关键，但因判读存在主观性差异，精准风险分层始终是临床挑战。如何突破传统病理的局限，借助分子特征实现更精准的预后判断和治疗选择，成为领域内亟待解决的核心问题。

在此背景下，日本庆应义塾大学医学院（Keio University School of Medicine）的研究团队开展了一项具有突破性的研究，相关成果发表于《BJC Reports》。该研究旨在对比下一代测序（Next-Generation Sequencing, NGS）与 Proactive Molecular Risk Classifier for Endometrial Cancer（ProMisE）算法在子宫内膜癌分子分型中的价值，以期为临床提供更精准的分子分型工具。研究通过对 200 例子宫内膜癌患者的肿瘤样本进行深度分子分析，发现 NGS 在分子分型的准确性和预后预测能力上显著优于 ProMisE，为子宫内膜癌的个体化治疗提供了新方向。

关键技术方法

研究采用了以下主要技术方法：

1. NGS 癌症基因 panel 检测：使用自主开发的 Rapid-Neo 测序系统，对 145 个癌症相关基因进行靶向测序，覆盖 POLE、TP53 等关键基因的突变、肿瘤突变负荷（Tumor Mutational Burden, TMB）、微卫星不稳定性（Microsatellite Instability, MSI）状态及拷贝数变异（Copy Number Alteration, CNA）等指标。
2. 分子亚型分类标准：基于 NGS 数据，按照层级分类法确定分子亚型。POLE 亚型需检测到 POLE 核酸外切酶结构域突变（包括已知热点及如 V411M 等未特征化位点，结合 TMB-H）；MSI-H 亚型以 MSIsensor 评分≥12 界定；拷贝数低（Copy Number Low, CN-L）和拷贝数高（Copy Number High, CN-H）亚型分别以 CNA 计数 < 35 和≥35 区分。
3. 免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）分析：检测 p53 及错配修复（Mismatch Repair, MMR）蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）表达，辅助分子分型及 Lynch 综合征筛查。
4. 临床数据整合：结合患者的 FIGO 分期、组织学类型、淋巴结转移、复发情况等临床病理数据，进行生存分析。

研究结果

1. 基于 NGS 的分子亚型分布及临床特征

• 亚型分布：200 例 EC 中，CN-L 亚型最常见（104/200, 52.0%），其次为 MSI-H（38/200, 19.0%）、POLE（33/200, 16.5%）和 CN-H（25/200, 12.5%）。
• 临床关联：CN-H 亚型与高级别组织学类型（p<0.001）、FIGO III-IV 期（p=0.006）、淋巴血管间隙浸润（Lymphovascular Space Invasion, LVSI）阳性率（p<0.001）及复发率（p<0.001）显著相关，预后最差。POLE 亚型则表现出最优的无进展生存（Progression-Free Survival, PFS）和总生存（Overall Survival, OS）。

2. 分子特征与基因组变异

• 突变负荷与稳定性：POLE 亚型 TMB 最高（154.1 突变 / Mb），呈超突变特征；MSI-H 亚型 MSIsensor 评分最高（47.69），TMB 为 29.6 突变 / Mb；CN-H 亚型 CNA 计数最高（58.4），基因组不稳定性显著。
• 基因变异谱：POLE 亚型中，P286R（51.5%）和 V411L（27.3%）为常见突变，18.2%（6/33）同时存在 MSI-H。MSI-H 亚型中，55%（21/38）存在 MLH1 甲基化，24%（9/38）确诊为 Lynch 综合征。CN-H 亚型中，56% 存在 TP53 突变，但 48%（12/25）免疫组化显示 p53 野生型，提示 ProMisE 可能漏诊部分 CN-H 病例。

3. NGS 与 ProMisE 的生存分析对比

• NGS 分型：四亚型间 OS 差异显著（p=0.006），CN-H 亚型 3 年 OS 仅为 90.5%，而 POLE 亚型 3 年 PFS 达 100%。
• ProMisE 分型：仅 PFS 存在差异（p<0.001），OS 无显著差异（p=0.117），提示其预后预测能力有限。

4. 复杂分子特征与诊断挑战

• POLE 与 MSI-H 重叠：6 例 POLE 亚型同时为 MSI-H，提示分子互作复杂性，可能影响免疫治疗响应。
• 检测手段差异：免疫组化与 NGS 在 p53 状态、MSI-H 检测中存在不一致，如 CN-L 亚型中 3 例 p53 免疫组化与 NGS 突变结果矛盾，提示需结合多技术综合判读。

结论与讨论

本研究证实，NGS 在子宫内膜癌分子分型中显著优于 ProMisE，其基于基因组全景的分层方法能更精准预测预后，尤其对 CN-H 亚型中传统病理和免疫组化漏诊的高危病例具有重要识别价值。研究首次发现 POLE 亚型中存在 MSI-H 重叠病例，为探索双重分子特征对治疗的指导意义提供了新方向。此外，NGS 在检测非热点突变、区分体细胞与胚系突变（如 Lynch 综合征筛查）中的优势，凸显了其在个体化医疗中的潜力。

尽管研究存在单中心、样本量有限等局限性，但其结果为《国际妇产科联合会（FIGO）2023 年子宫内膜癌分期系统》中强调的分子特征整合提供了实证支持，推动 NGS 从研究走向临床实践，有望成为子宫内膜癌精准诊疗的核心工具。未来需更大队列验证，并探索基于 NGS 分型的靶向治疗策略，进一步提升患者生存获益。