CREBBP 失活通过非经典机制使 B 细胞急性淋巴细胞白血病对 BCL2 抑制诱导的铁死亡敏感

B 细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）预后差，尤其 CREBBP 突变患者化疗耐药问题突出。研究人员针对 CREBBP 突变 B-ALL 开展药物筛选，发现 BCL2 抑制剂 Venetoclax 通过非凋亡的铁死亡机制杀伤肿瘤细胞，且 CREBBP 抑制剂可协同增敏，为临床提供新联合方案。

　　

B 细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）作为儿童最常见的血液恶性肿瘤，尽管多数儿童患者可通过多药化疗治愈，但高危遗传亚型、复发患者及成年患者的治疗仍面临巨大挑战，尤其是携带 CREBBP（CREB 结合蛋白）突变的患者，常表现出化疗耐药和不良预后。CREBBP 作为组蛋白乙酰转移酶，其功能缺失（LOF）突变在 B-ALL 中与高危特征、持续微小残留病（MRD）及复发密切相关，因此亟需针对这类患者的新型治疗策略。

剑桥大学等机构的研究人员围绕 CREBBP 突变的高危 B-ALL 展开研究，发现 BCL2 抑制剂 Venetoclax 在这类肿瘤中具有显著杀伤作用，且其机制与传统凋亡途径不同，为铁死亡（ferroptosis）。相关研究发表在《Nature Communications》，为 B-ALL 的治疗提供了新方向。

研究主要采用了以下关键技术方法：

1. 基因编辑技术：利用 CRISPR-Cas9 构建 CREBBP 野生型（WT）和突变型（如 R1446C 敲入突变克隆 697KI、完全敲除克隆 697KO）的等基因 B-ALL 细胞系。
2. 药物筛选与功能验证：通过靶向药物筛选，评估多种小分子化合物对 CREBBP 突变细胞的敏感性，并结合细胞增殖、凋亡 / 铁死亡标记物检测（如 Annexin-V、线粒体膜电位、脂质过氧化标志物 BODIPY_C11）进行机制分析。
3. 多组学分析：包括 RNA 测序（RNA-seq）、染色质免疫沉淀（ChIP）、CUT&RUN、蛋白质组学和脂质组学，系统解析 CREBBP 突变导致的转录、代谢及脂质组成变化。
4. 动物模型：利用 NSG 小鼠构建 B-ALL 移植模型，验证 Venetoclax 单药及与 CREBBP 抑制剂（如 Inobrodib）联合用药的体内疗效。

研究结果

1. CREBBP 突变 B-ALL 对 Venetoclax 敏感性增强

通过等基因细胞系筛选发现，CREBBP 突变细胞（697KI/KO）对 Venetoclax 的半数抑制浓度（IC₅₀）显著低于野生型细胞，且低剂量 Venetoclax 即可诱导线粒体膜电位丧失、Annexin-V 外化等细胞死亡特征。机制上，Venetoclax 通过靶向 BCL2 发挥作用，而对其他抗凋亡蛋白（如 BCL_XL、MCL1）无特异性，证实其作用依赖 BCL2 抑制。

2. CREBBP 突变导致细胞周期和代谢失调

RNA-seq 显示，CREBBP 突变细胞中凋亡相关通路虽下调，但 BCL2 表达轻度上调，同时伴随细胞周期阻滞（G1 期比例增加）和代谢异常，包括糖酵解和氧化磷酸化（OxPhos）速率升高。脂质组学发现，突变细胞中多不饱和脂肪酸（PUFA）含量增加，醚脂（如缩醛磷脂）水平显著降低，这些变化使细胞对氧化应激和铁死亡更敏感。

3. Venetoclax 通过铁死亡机制杀伤 CREBBP 突变细胞

低剂量 Venetoclax 处理 CREBBP 突变细胞时，铁死亡特异性抑制剂 Liproxstatin 1 可显著挽救细胞存活，而泛 caspase 抑制剂 Z-VAD 仅部分逆转高剂量药物的杀伤作用，表明低剂量下铁死亡为主要机制。代谢分析显示，Venetoclax 选择性降低突变细胞的 OxPhos，伴随脂质过氧化增强，进一步支持铁死亡机制。

4. CREBBP 功能抑制可协同增敏 Venetoclax

利用 CREBBP/EP300 抑制剂（A485、Inobrodib）处理野生型细胞，可模拟 CREBBP 突变表型，增强对 Venetoclax 的敏感性，且这种协同作用在多种基因型的 B-ALL 细胞系（包括 BAX 突变的 NALM6）中均成立。动物实验显示，Inobrodib 与 Venetoclax 联合用药显著延长荷瘤小鼠生存期，在携带 CREBBP 突变的患者来源异种移植（PDX）模型中效果尤为显著。

5. 耐药机制与治疗策略

长期暴露于 Venetoclax 的细胞产生耐药后，转录谱趋同，表现为 BCL2 上调、细胞周期相关基因激活及 AGPS（醚脂合成关键酶）表达恢复。耐药细胞对铁死亡诱导剂 Erastin 敏感性增强，提示联合用药可能克服耐药。

结论与讨论

本研究揭示了 CREBBP 突变通过重塑细胞代谢和脂质稳态，使 B-ALL 细胞对 BCL2 抑制诱导的铁死亡敏感，且 CREBBP 抑制剂可通过药理学模拟突变表型，与 Venetoclax 形成协同效应。这一发现不仅阐明了 CREBBP 突变肿瘤的独特脆弱性，还为临床开发 “CREBBP 抑制 + BCL2 抑制” 联合方案提供了理论依据，有望惠及包括野生型在内的更广泛 B-ALL 患者群体。此外，研究还发现铁死亡与醚脂代谢的关联，为靶向脂质代谢治疗血液肿瘤开辟了新方向。

该研究通过多维度实验验证和体内外模型结合，系统解析了 CREBBP 突变与铁死亡的关联，其成果为高危 B-ALL 的精准治疗提供了创新策略，具有重要临床转化价值。