miR-146a通过HDAC2-PI3K轴调控胰腺炎炎症反应的分子机制研究

本研究针对慢性胰腺炎(CP)疼痛机制不明的问题，通过建立LPS诱导的AR42J细胞模型，揭示了miR-146a通过靶向HDAC2调控PI3K信号通路的关键作用。研究发现TSA（曲古抑菌素A）和miR-146a模拟物可显著抑制炎症因子(IL-6/TNF-α)表达并促进细胞增殖，为开发靶向miR-146a/HDAC2的胰腺炎治疗策略提供了实验依据。

　　

慢性胰腺炎(CP)引发的顽固性疼痛一直是临床治疗的难点，其机制涉及复杂的神经炎症和胰腺纤维化过程。尽管已知组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在疼痛调控中起关键作用，但上游调控机制尚不明确。近年来，微小RNA(miRNA)的表观遗传调控成为研究热点，其中miR-146a被报道与炎症反应密切相关。然而，miR-146a是否通过调控HDAC2参与胰腺炎病理过程，以及这一过程是否涉及PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)信号通路，仍有待阐明。

赣州市人民医院的研究团队在《Biochemistry and Biophysics Reports》发表的研究中，通过LPS(脂多糖)诱导大鼠胰腺AR42J细胞建立胰腺炎模型，结合CCK-8细胞增殖检测、流式细胞术、双荧光素酶报告基因和免疫荧光共定位等技术，系统研究了miR-146a/HDAC2/PI3K轴在胰腺炎中的作用机制。

3.1 MiR-146a表达水平在LPS刺激的AR42J细胞炎症中升高
研究发现10 mg/L和90 mg/L LPS处理可显著上调IL-6和TNF-α表达，同时miR-146a表达水平随炎症程度增加而升高，提示miR-146a可能参与炎症调控。

3.2 MiR-146a减轻LPS刺激的炎症和纤维化
TSA和miR-146a模拟物干预能显著恢复LPS抑制的细胞增殖能力，降低凋亡率。ELISA检测显示两者均可下调IL-6水平，但对TNF-α影响不显著，提示可能存在浓度依赖性调控。

3.3 HDAC2与PI3K的共定位检测
免疫荧光首次证实HDAC2与PI3K在胰腺细胞中的共定位，且LPS处理增强两者表达，而TSA和miR-146a模拟物可逆转这一效应，表明HDAC2可能通过空间位阻调控PI3K活性。

3.4 双荧光素酶验证miR-146a靶向HDAC2
在293T细胞中，野生型HDAC2报告基因活性被miR-146a显著抑制，而突变型不受影响，确证了miR-146a与HDAC2 3'UTR的直接结合。

这项研究创新性地揭示了miR-146a通过表观遗传调控HDAC2表达，进而影响PI3K信号通路的分子机制。特别值得注意的是，TSA(HDAC抑制剂)与miR-146a模拟物显示出相似的抗炎效果，为开发基于miRNA的胰腺炎靶向治疗提供了双重策略。研究还首次在胰腺细胞中证实了HDAC2与PI3K的物理相互作用，为理解表观遗传调控与代谢信号通路的交叉对话提供了新视角。这些发现不仅对缓解慢性胰腺炎疼痛具有临床转化价值，也为其他HDAC2相关炎症性疾病的治疗研究开辟了新思路。