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为探究北极褐藻多糖生物活性,研究人员以线带藻(Chorda filum)为材料,采用水热辅助提取结合离子交换与尺寸排阻层析纯化。获中性 CPF1 和阴离子 CPF2,发现 CPF1 具强抗氧化(IC50值低至 3.06±0.12 mg/mL)及 α- 葡萄糖苷酶抑制活性(IC50 0.125±0.12 mg/mL),为开发功能食品和药物提供依据。
在生命科学与健康医学领域,天然多糖的生物活性研究一直是热点方向。北极地区特殊的地理环境造就了藻类独特的代谢途径,其产生的多糖可能蕴含特殊功能。然而,目前对北极褐藻中多糖的结构与生物活性研究较少,多数研究集中于粗提物或多酚类成分,对其多糖的深入开发利用缺乏系统性数据。线带藻(Chorda filum)作为北极沿岸常见的褐藻,其细胞壁富含昆布多糖(laminarin)和岩藻聚糖(fucoidan)等复杂碳水化合物,但这些多糖的具体结构组成及抗氧化、抗糖尿病等生物活性尚未被充分揭示。因此,探究其多糖的提取工艺、结构特征及生物活性,对挖掘北极藻类资源的应用潜力具有重要意义。
为填补这一研究空白,研究人员以采自北极孔斯峡湾(Kongsfjorden)的线带藻为研究对象,开展了多糖的提取、纯化、结构表征及生物活性评价研究。该研究由相关机构(文中未明确标注第一作者单位)的科研团队完成,研究成果发表在《Carbohydrate Research》期刊,为北极褐藻多糖的开发提供了关键数据支撑。
研究采用的主要技术方法包括:水热辅助提取法获取粗多糖,通过离子交换层析(ion exchange chromatography)和尺寸排阻层析(size exclusion chromatography)对粗多糖进行分离纯化,得到中性组分 CPF1 和阴离子组分 CPF2;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振(NMR)技术(包括1H NMR 和13C NMR)分析多糖的官能团和糖链结构;通过凝胶渗透色谱(GPC)测定多糖分子量;采用 1,1 - 二苯基 - 2 - 三硝基苯肼(DPPH)自由基清除、2,2 - 联氮 - 二 (3 - 乙基 - 苯并噻唑 - 6 - 磺酸) 二铵盐(ABTS)自由基清除、过氧化氢(H2O2)清除实验评价抗氧化活性,以 α- 葡萄糖苷酶抑制实验评估抗糖尿病潜力;运用高效液相色谱(HPLC)分析单糖组成。
粗多糖的 proximate composition 分析
对冻干的线带藻生物质进行分析发现,其干重中灰分含量较高(139.7 mg/g),脂质含量为 5.90 mg/g,蛋白质含量较低(2.2 mg/g),碳水化合物含量达 146.64 mg/g,总酚含量为 3 mg 没食子酸当量(GAE)/g。色素组成以叶绿素 a(~0.1 mg/g)和叶绿素 b(0.05 mg/g)为主,类胡萝卜素含量极低(0.0003 mg/g),显示其碳水化合物是主要活性成分来源。
CPF1 的生物活性评价
CPF1 作为主要组分,表现出显著的抗氧化活性:DPPH 自由基清除的 IC50为 5.21±0.24 mg/mL,ABTS 自由基清除的 IC50为 3.28±0.04 mg/mL,H2O2清除的 IC50为 3.06±0.12 mg/mL。其 α- 葡萄糖苷酶抑制活性尤为突出,IC50为 0.125±0.012 mg/mL,与阳性对照药阿卡波糖(acarbose)相当,提示其在抗糖尿病领域的应用潜力。
CPF1 的结构表征
FTIR 分析显示,CPF1 在 3335 cm-1(O-H 伸缩振动)、2919 cm-1(C-H 伸缩振动)、1369 cm-1(C=O 伸缩振动)、1100 cm-1和 1030 cm-1(C-O 伸缩振动)处有特征峰,表明其含典型多糖官能团。单糖组成分析表明,CPF1 主要由葡萄糖组成,并含有甘露醇残基。1H NMR 谱中 δ 3.3–3.6 ppm(C6)、δ 3.5–3.7 ppm(C4)、δ 3.6–3.9 ppm(C5)、δ 4.3–4.5 ppm(C2)、δ 4.6–4.8 ppm(C3)和 δ 5.1–5.3 ppm(C1)的峰,以及13C NMR 谱中 δ 60.66、68.08、73.28、75.60、84.11 和 102.5 ppm 的峰,均符合 m 型 β-(1,3)- 葡聚糖结构特征。GPC 测定其分子量约为 64 kDa,证实其为中等分子量的 m 型昆布多糖。
研究结论与意义
本研究首次系统揭示了线带藻中 m 型昆布多糖 CPF1 的结构与生物活性,证实其通过多途径发挥抗氧化和 α- 葡萄糖苷酶抑制作用。研究结果不仅为北极褐藻资源的高值化利用提供了理论依据,也为开发天然抗氧化剂和抗糖尿病功能食品 / 药物提供了新候选化合物。此外,该研究拓展了对极端环境藻类多糖结构 - 活性关系的认识,为后续深入研究北极生物活性物质奠定了基础。未来可进一步开展 CPF1 的体内活性验证及作用机制研究,推动其从实验室向产业化应用转化。