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本研究对河南东南部大别山北麓 267 份野生啮齿类粪便样本分析,发现隐孢子虫感染率 21.3%,鉴定出 5 种虫种、2 种新型基因型及 C. viatorum 新亚型 XVgA4,揭示其遗传多样性与传播风险,为隐孢子虫病防控提供科学依据。
研究背景
隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)是重要的人兽共患病原,通过粪便传播引发腹泻,野生啮齿类因数量多、分布广成为其重要传播媒介。河南东南部大别山北麓野生动物资源丰富,但当地野生啮齿类中隐孢子虫的流行特征尚不清楚,因此开展本研究以明确该区域野生啮齿类的感染率及遗传特性。
研究方法
2023 年 3 月至 2024 年 4 月,在大别山北麓捕获 267 只野生啮齿类,采集肠道粪便样本提取 DNA。通过 PCR 扩增脊椎动物通用细胞色素 b(cytb)基因进行宿主种属鉴定,利用巢式 PCR 扩增小亚基(SSU)rRNA、肌动蛋白(actin)、热休克蛋白 70(HSP70)和 60 kDa 糖蛋白(gp60)基因,分析隐孢子虫的虫种、基因型和亚型。
研究结果
宿主与感染率
鉴定出 7 种野生啮齿类,包括大足鼠(Niviventer lotipes,117 只)、黑线姬鼠(Apodemus agrarius,98 只)等。隐孢子虫总体感染率为 21.3%(57/267),不同宿主感染率存在差异,其中黄胸鼠(Rattus tanezumi)感染率最高(33.3%,1/3),其次为大林姬鼠(Apodemus draco,22.2%,4/18)等。
虫种与基因型
检测到 5 种已知虫种:Apodemus 隐孢子虫(C. apodemi,12 例)、泛在隐孢子虫(C. ubiquitum,11 例)、Viatorum 隐孢子虫(C. viatorum,7 例)、鼠隐孢子虫(C. ratti,2 例)和隐蔽隐孢子虫(C. occultus,2 例)。此外,发现 2 种新型基因型:大鼠基因型 VI(Cryptosporidium sp. rat genotype VI,8 例)和 VII(15 例)。其中,基因型 VI 与猪隐孢子虫(C. suis)、隐蔽隐孢子虫遗传关系较近,基因型 VII 与鼠隐孢子虫亲缘关系密切。
亚型分析
对 C. viatorum 的 gp60 基因分析发现新亚型家族 XVg,其中亚型 XVgA4 通过丝氨酸重复区 TCA 三联核苷酸数目确定,其在系统发育树中与已知亚型家族 XVe、XVf 及 XVa 聚类。
季节与生境影响
感染率呈现季节性差异,秋季最高(35.6%,37/104),冬季和春季最低(8.3% 和 8.0%);田间生境感染率(26.9%,39/145)显著高于森林(14.8%,18/122),提示气候和环境可能影响传播动态。
研究结论
本研究首次揭示大别山北麓野生啮齿类隐孢子虫的流行特征,发现 2 种新型基因型和 1 种新亚型,证实当地存在较高的传播风险。研究结果强调了野生啮齿类在隐孢子虫传播中的作用,建议在流行病学监测和防控中考虑宿主特异性及环境因素,为隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)的防治提供重要参考。