大鼠血浆中罗氟司特纳米颗粒药代动力学研究的反相高效液相色谱（RP-HPLC）方法建立与验证

为准确测定大鼠口服纳米颗粒后血浆中罗氟司特含量，研究人员开发并验证 RP-HPLC 方法。采用 Phenomenex C-18 柱，流动相为乙酸铵缓冲液（pH=7.0）- 乙腈 - 甲醇（20:40:40, v/v/v），在 254 nm 检测。结果显示 LOQ 为 0.18 μg/ml，LOD 为 0.54 μg/ml，方法准确可靠，适用于药代动力学研究。

　　本研究旨在开发并验证一种灵敏、专属、快速且精准的反相高效液相色谱（RP-HPLC）方法，用于测定大鼠血浆中的罗氟司特（Roflumilast）。研究背景为探究大鼠摄入纳米颗粒后血浆中罗氟司特的检测方法，需开发并验证生物分析方法。方法学方面，药物样品（罗氟司特）通过等度洗脱，流动相由乙酸铵缓冲液（pH=7.0）、乙腈和甲醇按体积比 20:40:40 组成，使用 Phenomenex C-18 分析柱（150mm×4.68mm，孔径 5 微米）。药物通过标准校准曲线（范围为 1.5、3.0、4.5、6.0、7.5μg/mL^-1）在 254nm 紫外波长下进行定量测定。结果表明，定量限（LOQ）为 0.18μg/ml，检测限（LOD）为 0.54μg/ml。日内和日间分析的相对标准偏差（% RSD）均小于 2%，药物的准确度百分比在 96% 至 98% 之间。结论显示，根据既定方案，所开发方法在特异性、线性、准确度、精密度、稳健性和灵敏度分析方面均通过定量评估，适用于预期用途。负载罗氟司特的纳米颗粒可通过当前验证的 RP-HPLC 方法有效测定药物包封率。此外，实现了从血浆中高效提取药物，流动相组成适用于大鼠体内负载罗氟司特纳米颗粒的药代动力学研究。
关键词：ICH 指南；RP-HPLC；测定；罗氟司特；定量；血浆