人脱落乳牙干细胞在血小板裂解物与胎牛血清中的生长特性比较及其再生医学应用价值

为解决胎牛血清(FBS)在干细胞培养中的伦理和安全性问题，伊朗伊斯法罕医科大学的研究团队比较了人血小板裂解物(hPL)与FBS对人脱落乳牙干细胞(SHED)生长、形态的影响。研究发现，hPL与FBS在SHED增殖能力、形态特征上无显著差异，但hPL组细胞宽度更大(28μm vs. 26μm)，长度更短(137.9μm vs. 148.1μm)。该研究为再生医学提供了无动物源性血清的替代方案，发表于《European Journal of Medical Research》。

　　

在再生医学领域，寻找安全高效的干细胞培养体系一直是科学家们攻坚的重点。传统胎牛血清(FBS)虽能有效支持干细胞生长，却面临伦理争议、潜在病原体污染和异种蛋白致敏等风险。尤其当涉及临床转化时，这些缺陷更显突出。与此同时，人脱落乳牙干细胞(SHED)因其来源广泛、多向分化潜能和低免疫原性，成为组织工程的热门"种子细胞"。如何为这类干细胞寻找FBS的替代品，成为推动再生医学发展的关键一环。

伊斯法罕医科大学的研究团队将目光投向了人血小板裂解物(hPL)。这种富含生长因子的人源性培养基，理论上既能规避动物血清的缺陷，又符合临床应用的合规要求。但hPL是否真能媲美FBS对SHED的支持效果？二者培养的细胞在形态和增殖动力学上有何差异？这些问题直接关系到未来临床应用的可行性。

研究团队采用标准化实验流程：从6-9岁儿童脱落的健康乳牙中分离SHED，分别用含10% hPL和20% FBS的α-MEM培养基培养。通过细胞计数、MTT法检测活力，并运用ImageJ软件精确测量细胞长度、宽度及表面积。所有实验设置三重重复以确保结果可靠性。

生长动力学显示颠覆性发现
在传代0的第4、6、9天，hPL组的细胞表面积显著大于FBS组，但在第2天却呈现相反趋势。至第10天时，两组表面积差异消失。这种动态变化提示hPL可能通过差异激活生长因子受体，暂时性改变细胞铺展状态。更令人意外的是，两组在3天和9天的增殖速率、细胞汇合度等关键指标上无统计学差异，这一发现在后续4次传代中均得到验证。

形态学参数揭示培养基特性
hPL培养的SHED展现出"短胖"特征：平均宽度比FBS组宽2μm(28μm vs. 26μm)，长度却短10.2μm(137.9μm vs. 148.1μm)。这种形态差异可能与hPL中血小板衍生生长因子(PDGF)和转化生长因子(TGF)的协同作用有关，这些因子能重塑细胞骨架结构。值得注意的是，两组细胞的菱形表面积计算公式显示，最终整体表面积在10天培养后趋于一致，说明不同培养基可能通过不同途径实现相似的生长终点。

讨论与展望
该研究首次系统比较了hPL与FBS对SHED的培养效果，证实人源性血小板裂解物可完全替代传统动物血清。这不仅解决了临床级干细胞制备的原料瓶颈，更为牙源性干细胞库的标准化建设提供了技术支撑。研究者特别指出，hPL组细胞更接近体内的形态特征，可能更利于后续分化。但研究也存在局限，如未评估长期传代后的基因组稳定性，以及分化潜能是否受培养基影响。

这项发表于《European Journal of Medical Research》的成果，为再生医学的临床转化扫清了一个关键技术障碍。未来研究可进一步优化hPL的制备工艺，并探索其与生物支架材料的协同效应。随着无动物成分培养体系的完善，SHED在神经修复、骨再生等领域的应用将迎来更广阔前景。