单细胞转录组解析高致病性猪流行性腹泻病毒（PEDV）与宿主的互作机制及肠道修复新靶点

本研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）揭示了高致病性PEDV毒株CH/HLJ-22感染后猪空肠细胞的动态变化，首次发现病毒可感染B/T淋巴细胞但引发流产性感染，同时阐明Wnt通路驱动的干细胞分化加速和IFN-γ/IL-10信号平衡在肠道修复与免疫调控中的核心作用，为冠状病毒跨物种传播及靶向治疗提供新见解。

　　

A novel PEDV virulent strain was isolated from diarrhea piglets
从黑龙江暴发腹泻的猪场中分离出高致病性PEDV毒株CH/HLJ-22，全基因组测序显示其属于GII-a亚型。该毒株感染3日龄仔猪后60小时内致死，病理特征包括小肠绒毛萎缩、上皮脱落及病毒载量峰值出现在空肠，电镜观察到典型的冠状病毒刺突结构。

Single-cell transcriptome landscape of the piglet jejunum
对19,612个空肠细胞进行scRNA-seq分析，鉴定出11种细胞类型：肠上皮细胞（表达FABP6/ACE2）、祖细胞（APOA1⁺）、干细胞（OLFM4⁺LGR5⁺）、TA细胞（STMN1⁺）、免疫细胞等。感染组显示细胞死亡调控和病毒应答通路富集，qPCR验证关键差异基因如CCL21和MMRN1的表达变化。

PEDV infection promotes stem cell differentiation
伪时序分析揭示感染加速干细胞→TA细胞→肠上皮祖细胞的分化轨迹。增殖相关基因（LGR5/TOP2A）和Wnt靶基因（AXIN2/CCND1）显著上调，间质细胞分泌的CXCL12/HGF增加，共同构成促进上皮再生的微环境。

Cell-cell communication network in control and PEDV-infected intestine
病毒破坏细胞间通讯网络，但特异性激活IFN-γ和IL-10通路：T细胞通过IFNGR1增强巨噬细胞抗病毒活性，而B/T细胞分泌的IL-10抑制过度炎症。M2型巨噬细胞比例增加进一步印证免疫平衡机制。

PEDV tropism may not be exclusively restricted to enterocytes
1,022个病毒阳性细胞中，除肠上皮外，B/T淋巴细胞、间质细胞等均检测到PEDV基因。相关性分析表明pAPN（r=0.38）是主要受体，但其他细胞感染可能依赖未知因子。

PEDV is capable of infecting B cells yet fails to establish effective replication
体外实验证实病毒通过胰酶依赖途径感染B细胞，可检测到dsRNA和亚基因组RNA，但无法产生感染性子代病毒。B细胞亚群分析显示抗体分泌细胞（ASCs）比例增加，PRDM1/IRF4表达上调驱动抗体产生。

PEDV infection can impair T cell function and induce its apoptosis
T细胞感染后凋亡率增加11.9%，Tfh细胞中CXCR5/IL21表达下降削弱B细胞辅助功能，而CTL细胞的IFN-γ/GZMB上调但PRF1不变，提示细胞毒作用受限。

讨论
该研究首次系统描绘PEDV感染的单细胞图谱，揭示病毒通过"流产性感染"免疫细胞实现免疫逃逸，而宿主通过Wnt通路加速干细胞分化修复损伤，IFN-γ/IL-10的动态平衡成为决定感染结局的关键。间质细胞-上皮细胞互作和M2巨噬细胞极化等发现，为开发靶向肠道修复的抗病毒策略提供新方向。