WX-081通过靶向ATP合成酶并激活宿主先天免疫双重机制抑制结核分枝杆菌：耐药结核治疗的新突破

这篇研究揭示了新一代抗结核候选药物WX-081的双重作用机制：通过靶向结核分枝杆菌ATP合成酶亚基atpE破坏质子动力势（PMF），同时激活宿主NF-κB/MAPK免疫通路。该研究填补了WX-081（已进入III期临床试验）作用机制的空白，为克服贝达喹啉（BDQ）的心脏毒性等临床局限提供了科学依据，对推动耐药结核（DR-TB）治疗具有重要意义。

　　

WX-081的耐药机制与靶点验证
通过逐步诱导和自发突变实验，发现WX-081耐药株普遍存在atpE基因突变（如Ala63Val/Thr/Pro），与贝达喹啉（BDQ）耐药突变位点重叠。交叉耐药实验显示，WX-081对BDQ耐药株（如atpE^D28G）的MIC值升高16倍，证实二者共享ATP合成酶靶点。分子对接揭示WX-081通过氢键和离子作用结合atpE关键残基Asp32/Glu65，与BDQ作用模式高度相似。

能量代谢的双重破坏
WX-081在1/16×MIC至8×MIC浓度范围内呈剂量依赖性抑制结核分枝杆菌ATP合成，效果与阳性对照DCCD相当。利用耻垢分枝杆菌反向膜囊泡（IMV）模型，证实WX-081（0.01-1 μM）通过质子载体活性选择性瓦解跨膜pH梯度（ΔpH），但不影响膜电位（Δψ）。这种与BDQ类似的电中性解耦联作用，阻断了电子传递与ATP合成的偶联。

先天免疫的协同激活
NF-κB/MAPK双荧光素酶报告系统显示，WX-081显著激活免疫信号通路，效果甚至优于BDQ。在LPS刺激或结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中，WX-081上调促炎因子（TNF-α、IL-6、IL-12）和I型干扰素（IFNα/β），同时抑制免疫负调控因子IL-10。RNA测序发现WX-081处理组中STK4、MAPK14、TNFRSF11A等免疫相关基因显著上调，并富集于HIF-1、ROS和糖酵解通路，而mTOR通路被抑制。

耐药菌的免疫清除
突破性发现WX-081对自身耐药株（WX-081r-Mtb）仍具杀菌活性——通过激活巨噬细胞免疫应答，使感染48小时后的菌落数（CFU）显著降低。这种"免疫辅助杀菌"特性暗示其临床应用中可能延缓耐药性产生。

临床转化价值
作为BDQ的改良版，WX-081在保持靶向atpE核心机制的同时，通过独特的免疫调节能力拓展了抗菌维度。研究为破解BDQ的心脏毒性（QTc延长）和磷脂沉积症等临床瓶颈提供了新思路，其双重机制可能为耐药结核（MDR-TB/XDR-TB）及非结核分枝杆菌感染提供更优解决方案。