老挝儿童重症肺炎中肺炎链球菌密度与呼吸道病原共检出的关联研究

为解决儿童重症肺炎病原协同作用机制不清的问题，法国艾克斯-马赛大学等机构联合开展了一项前瞻性观察研究，通过qPCR检测934例住院患儿上呼吸道样本，发现流感病毒阳性者肺炎链球菌密度升高4.52倍，但RSV/肺炎链球菌共检出与疾病严重度的关联在调整混杂因素后未获证实。该研究揭示了呼吸道病毒-细菌相互作用的复杂性，为LMICs地区肺炎防控策略提供了新证据。

　　

在全球范围内，急性呼吸道感染（ARI）始终是威胁儿童健康的首要杀手，尤其在医疗资源有限的老挝等中低收入国家（LMICs），肺炎的病原学特征更是迷雾重重。尽管已知肺炎链球菌（S. pneumoniae）和呼吸道合胞病毒（RSV）是儿童肺炎的常见元凶，但这些病原体如何在人体内"狼狈为奸"加重病情，科学家们至今未能完全破解。更令人担忧的是，随着肺炎球菌结合疫苗（PCV13）的推广，病原体间的相互作用可能发生微妙变化，这给临床防治带来了新的挑战。

为揭开这一谜团，法国艾克斯-马赛大学联合老挝牛津大学玛霍索医院研究中心等机构的研究团队，开展了一项为期三年的前瞻性观察研究。他们收集了934例5岁以下住院患儿的鼻咽拭子，采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术精准检测了包括S. pneumoniae、流感病毒和RSV在内的8种呼吸道病原体，并通过创新的统计学方法分析了病原共检出与疾病严重度的关联。

研究采用了多项关键技术：1）基于lytA基因的qPCR定量检测S. pneumoniae鼻咽携带密度；2）多重RT-qPCR检测33种呼吸道病原体（2013-2014年）和靶向7种主要病原体的单重qPCR（2015-2016年）；3）使用STGG培养基优化样本运输和保存；4）通过负二项回归等高级统计模型控制混杂因素。

研究结果

Characteristics of children hospitalized with ARI
研究人群以2岁以下婴幼儿为主（73.9%），中位年龄14.7个月。63.8%符合肺炎标准，其中40.4%为重症肺炎，病死率达2%。RSV检出率最高（29.9%），显著高于流感病毒（9.2%）。

Association between viral infection and increased pneumococcal density
在352例携带S. pneumoniae的患儿中，流感病毒阳性者的肺炎链球菌密度是阴性者的4.52倍（aRR 4.52, 95%CI 1.73-11.8），而RSV携带者未见此关联。这一发现印证了流感病毒可能通过提供唾液酸等营养物质促进S. pneumoniae生长的假说。

Association between co-detection and severe pneumonia
虽然单因素分析显示RSV/S. pneumoniae（OR 1.86）和RSV/H. influenzae（OR 2.09）共检出与重症肺炎相关，但调整年龄、营养状况等混杂因素后，这种关联均消失（aOR 0.72和1.37）。S. pneumoniae/H. influenzae共检出率虽达24%，但与疾病严重度无显著关联。

In RSV positive patients, unadjusted association between Pneumococcal density and severe pneumonia
在102例RSV阳性患儿中，重症与非重症患者的S. pneumoniae密度无统计学差异（p=0.096），这与以色列学者发现的RSV疾病严重度与特定肺炎球菌血清型相关的结论形成对比。

讨论与结论
这项研究首次系统揭示了老挝儿童肺炎病原谱特征，其创新性发现在于：1）证实了流感病毒（而非RSV）对S. pneumoniae鼻咽携带密度的特异性促进作用；2）挑战了RSV与细菌共检出必然加重病情的传统认知；3）为COVID-19疫情期间观察到的肺炎球菌疾病减少现象提供了新解释——病毒流行抑制可能比细菌携带密度变化更关键。

研究局限性包括缺乏下呼吸道样本和健康对照组，且PCV13接种率仅47.3%可能影响结果。作者建议未来应关注：1）RSV疫苗对肺炎球菌肺炎的间接保护效果；2）不同肺炎球菌血清型与病毒的交互作用；3）后疫情时代呼吸道病毒生态变化对细菌性疾病的影响。这项发表于《Scientific Reports》的研究为LMICs地区优化肺炎防控策略提供了重要循证依据。