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为解决胰腺导管腺癌（PDAC）化疗耐药及上皮 - 间充质转化（EMT）驱动转移的难题，研究人员利用 KPC-Luc 原位小鼠模型，通过单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）等分析吉西他滨（G）+ 帕立骨化醇（P）+ 羟氯喹（H）的作用。发现 GPH 可抑制 EMT，下调纤连蛋白（Fn1）等通路，为 PDAC 治疗提供新方向。
论文解读
研究背景
胰腺导管腺癌（PDAC）是恶性程度极高的消化道肿瘤，5 年生存率仅约 10%，化疗药物吉西他滨（G）疗效有限，其耐药性与上皮 - 间充质转化（EMT）密切相关。EMT 是指上皮细胞失去极性、获得间充质特性，导致肿瘤细胞侵袭性增强、转移能力提升且对治疗耐受。PDAC 肿瘤微环境（TME）复杂，包含癌症相关成纤维细胞（CAFs）、巨噬细胞等多种细胞，通过纤连蛋白（Fn1）、胶原蛋白等细胞外基质成分及配体 - 受体相互作用（如Fn1-CD44/Sdc4、胶原蛋白 - 整合素）驱动 EMT 进程。因此，阻断 EMT 相关信号轴成为 PDAC 治疗的关键突破口。
为探索更有效的联合治疗方案，美国阿拉巴马大学伯明翰分校的研究团队开展了相关研究，旨在解析吉西他滨（G）、维生素 D 类似物帕立骨化醇（P）与自噬抑制剂羟氯喹（H）的三联疗法（GPH）对 PDAC 的作用机制。该研究成果发表于《Cancer Letters》。
主要研究方法
研究采用 KPC-Luc 原位小鼠 PDAC 模型，设置假手术组、PH 组、G 组及 GPH 组，通过以下技术解析治疗机制：
- 单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）：分析肿瘤内细胞异质性及基因表达变化；
- 高维加权基因共表达网络分析（hdWGCNA）：构建基因共表达网络，识别关键信号模块；
- 细胞间通讯分析（CellChat）：解析配体 - 受体相互作用网络，明确细胞间信号传导变化；
- 肿瘤重量评估：验证 GPH 的体内抗肿瘤效果。
研究结果
1. GPH 治疗抑制 PDAC 肿瘤生长并重塑细胞组成
scRNA-seq 显示，GPH 组肿瘤重量显著低于其他组，提示其强效抗肿瘤活性。无监督聚类鉴定出 7 种主要细胞类型：PDAC 上皮细胞、T 细胞、NK 细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和 B 细胞。进一步分析表明，GPH 治疗下调间充质基因模块（如Fn1），增强上皮特征，逆转 EMT 进程。
2. GPH 破坏纤连蛋白和胶原蛋白信号轴
hdWGCNA 分析发现，GPH 处理后，肿瘤内胶原蛋白和Fn1通路的共表达网络显著减弱。其中，癌症相关成纤维细胞（CAFs）主导胶原蛋白信号传导，而巨噬细胞介导Fn1信号。配体 - 受体相互作用分析显示，GPH 显著降低胶原蛋白 - 整合素、Fn1-CD44 及Fn1-Sdc4 等相互作用的强度，阻断肿瘤细胞与微环境细胞的 “串扰”，从而抑制 EMT 相关的侵袭和转移能力。
3. 细胞间通讯网络的重编程
通过 CellChat 分析细胞间通讯模式，发现 GPH 治疗后，促 EMT 的信号通路（如Fn1介导的巨噬细胞 - 肿瘤细胞通讯）被显著抑制，而维持上皮表型的信号通路得以增强。这一重塑表明，GPH 通过多维度干扰细胞间通讯，协同逆转 EMT 并增强化疗敏感性。
研究结论与意义
本研究通过单细胞分辨率的多组学分析，系统揭示了 GPH 三联疗法通过以下机制抑制 PDAC 进展：
- 下调间充质基因Fn1及胶原蛋白通路，逆转 EMT；
- 重塑肿瘤微环境中的细胞间通讯网络，减弱促转移的配体 - 受体相互作用；
- 增强吉西他滨的抗肿瘤活性，抑制肿瘤生长。
该研究首次在单细胞水平阐明了 GPH 疗法的多重作用机制，为 PDAC 治疗提供了两个关键启示：①纤连蛋白和胶原蛋白信号轴可作为潜在治疗靶点；②维生素 D 类似物与自噬抑制剂联合化疗的策略具有转化医学价值。未来可进一步探索靶向Fn1-CD44/Sdc4 或胶原蛋白 - 整合素通路的药物，或为 PDAC 患者带来新的治疗选择。
