聚乙烯醇替代胎牛血清在犬脂肪间充质基质细胞冷冻保存中的等效性与优势

为降低胎牛血清(FBS)在间充质基质细胞(MSCs)冷冻保存中的使用风险，研究人员探索了聚乙烯醇(PVA)、甲基纤维素(MC)等替代方案。研究发现，1% PVA联合10%二甲基亚砜(Me2SO)不仅能维持细胞活性，还显著降低MHC-II和CD34表达，为无血清冻存技术提供了新选择。

　　

间充质基质细胞(MSCs)作为具有多向分化潜能的细胞，在人类和动物细胞治疗领域展现出广阔前景。建立干细胞库离不开冷冻保存技术，目前普遍采用10%二甲基亚砜(Me₂SO)与90%胎牛血清(FBS)的冻存方案。然而该组合存在潜在风险：FBS可能携带病原体，且对细胞产生毒性作用。

为解决这一难题，研究团队测试了四种冻存保护剂：10% FBS、0.1%甲基纤维素(MC)、1%聚乙烯醇(PVA)和1%牛血清白蛋白(BSA)，均与10% Me₂SO及80%高糖DMEM培养基配伍。流式细胞术检测显示，0.1% MC组细胞存活率显著低于其他组（与BSA组相当）。值得注意的是，PVA处理组细胞表面标志物CD34（造血干细胞标记）和MHC-II（主要组织相容性复合体II类分子）表达水平最低，这一特性对降低免疫排斥反应尤为重要。

在分化潜能评估中，各组细胞的成骨和成脂诱导能力无显著差异。研究证实，仅含10% FBS的冻存液配合PVA或BSA，其细胞保护效果与传统90% FBS方案相当。特别值得一提的是，PVA展现出独特优势——能有效抑制免疫相关分子的表达，这为开发更安全的临床级细胞治疗产品提供了重要参考。