基于 RPA-CRISPR Cas13a 的即时检测技术用于快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐药基因

为解决耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染中mecA基因 S643N 突变检测问题，研究人员开展 RPA-CRISPR Cas13a 方法研究。该方法整合 RPA 与 CRISPR Cas13a 检测，灵敏度高（10 拷贝 / 反应），30 分钟内可区分野生型与突变型基因，为精准治疗提供依据。

　　本研究旨在开发一种高效检测单核苷酸多态性（SNP）的方法，聚焦金黄色葡萄球菌（S. aureus）mecA基因的 S643N 突变检测。该突变检测对指导抗生素合理使用、避免滥用及加强感染控制（尤其耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA 感染）至关重要。研究采用 RPA-CRISPR Cas13a 方法，将重组酶聚合酶扩增（RPA）与 CRISPR Cas13a 介导的检测整合为一步法，较传统两步法显著缩短检测时间。结果显示，该即时检测方法灵敏度高，每反应可检测低至 10 拷贝，能成功区分野生型与突变型mecA基因，一步法流程简化，检测时间＜30 分钟，结果与传统两步法一致。结论表明，该一步法助力快速精准检测 S643N 等单核苷酸突变，具重要临床价值，可指导抗生素精准治疗并提升金黄色葡萄球菌感染管理水平。