血清脂蛋白清除策略增强α-突触核蛋白种子扩增检测在帕金森病诊断中的灵敏度与特异性

本研究针对血液样本中脂蛋白抑制α-突触核蛋白（αSyn）种子扩增检测（SAA）灵敏度的难题，通过离心去除血清中高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL），建立"去脂"SAA新方法。结果显示，二次离心使帕金森病（PD）患者血清αSyn种子检出率从30%提升至80%，且特异性达92.43%，为PD无创早期诊断提供创新解决方案。

　　

帕金森病（PD）作为第二大神经退行性疾病，其病理特征α-突触核蛋白（αSyn）纤维聚集体在脑内扩散的过程，被形象地比喻为"朊病毒样传播"。种子扩增检测（SAA）技术通过模拟这一过程，已成为诊断PD的有力工具。然而，当科学家们试图将这一技术应用于更易获取的血液样本时，却遭遇了"信号屏蔽"困境——血清中丰富的脂蛋白如同干扰器般抑制αSyn聚集，导致检测灵敏度断崖式下降。

广州医科大学附属第一医院的研究团队在《Translational Neurodegeneration》发表的研究中，揭开了这一"干扰器"的真面目。他们发现，血清中>100 kDa的组分（主要是HDL、LDL及其携带的ApoA1、ApoE）能与αSyn紧密结合，形成"分子刹车"延缓聚集。通过巧妙的稀释-离心组合拳，研究人员成功剥离这些脂蛋白"枷锁"，使PD患者血清αSyn种子检出率实现三级跳——从初始30%跃升至80%，同时保持92.43%的高特异性。这项研究不仅为PD血液诊断打开新窗口，更揭示了脂蛋白调控αSyn病理传播的分子机制。

关键技术包括：1）分子量分级离心分离血清组分；2）硫黄素T（ThT）荧光监测αSyn聚集动力学；3）免疫沉淀去除特定载脂蛋白；4）透射电镜验证脂蛋白清除效果；5）双盲队列验证（样本来自临床PD患者和健康对照）。

血清组分分级揭示脂蛋白的关键抑制作用
通过离心分子量截留装置将血清分为5个组分，发现>100 kDa组分显著抑制αSyn自发聚集。质谱鉴定该组分含252种蛋白，其中HDL、LDL、ApoA1和ApoE丰度最高。

载脂蛋白与αSyn的"分子探戈"
ELISA实验捕捉到ApoE与αSyn的直接相互作用。当用免疫沉淀清除血清中ApoE后，αSyn种子活性立即"脱缰"，聚集速率（PAR）提升3.2倍，证实ApoE是天然聚集抑制剂。

离心剥离技术突破检测瓶颈
二次离心（21,000×g）使HDL和LDL含量分别降低50%和80%，透射电镜观察到脂质成分明显减少。此时SAA检测PD阳性率从30%跃升至80%，且健康对照全部阴性。

诊断效能验证
在扩大队列中，去脂SAA的曲线下面积（AUC）达0.8854，最大荧光强度（F_max）和PAR在PD组显著高于对照组（P<0.0001）。

这项研究开创性地证明，血清αSyn种子检测的瓶颈并非靶标缺失，而是"噪声淹没信号"。去脂SAA方案以<3小时的处理时长和<5%的试剂成本增幅，实现了与脑脊液检测相当的效能。尤为重要的是，该技术揭示PD患者血清中αSyn种子与脂蛋白存在异常结合模式，为理解病理传播提供了新视角。未来研究需在早期PD患者和不同亚型中验证该方法，并探索ApoE基因型对检测的影响。这项"离心突破"不仅为PD诊断带来曙光，更为其他蛋白病（如阿尔茨海默病）的血液检测提供了可借鉴的技术范式。