在头痛领域，畏光作为偏头痛的常见且恼人症状，困扰着约 90% 的偏头痛患者，甚至在发作间歇期仍有 75% 的患者持续受困于对光的过度敏感。目前，虽然已知三叉神经节（TG）激活在偏头痛相关畏光中起关键作用，且神经炎症机制在偏头痛病理生理中占据核心地位，但关于非编码 RNA，尤其是长链非编码 RNA（lncRNA）在其中的作用，却长期笼罩在未知的迷雾中。现有研究大多聚焦于神经肽、离子通道、细胞因子和信使 RNA（mRNA）对三叉神经节的激活作用，而像 NEAT1 这样的 lncRNA 是否参与其中，以及其背后潜在的调控网络，仍是亟待填补的科学空白。

为了揭开这些谜团，西安交通大学利物浦大学的研究人员开展了一系列研究。他们以小鼠为研究对象，利用快速诱导的畏光模型，深入探究 NEAT1 在三叉神经节中的作用及其调控机制。经过严谨的实验设计与分析，研究得出重要结论：NEAT1 通过与 miR-196a-5p、Trpm3 形成调控轴，促进小鼠的畏光行为。这一发现为理解偏头痛畏光的分子机制打开了新视角，也为偏头痛的治疗提供了极具潜力的新靶点。该研究成果发表在《The Journal of Headache and Pain》上。

研究人员主要采用了以下关键技术方法：首先，通过鼻内注射 TRPA1 激活剂伞花酮（UMB）诱导小鼠畏光行为，利用定制的黑白箱和视频跟踪系统评估小鼠在光区的停留时间；其次，运用 RNA 测序技术筛选三叉神经节中差异表达的 lncRNA 和 miRNA，并通过 qPCR 对测序结果进行验证；此外，构建 shNEAT1 腺相关病毒（AAV）载体以敲低 NEAT1，利用双荧光素酶报告基因实验验证 NEAT1 与 miR-196a-5p、Trpm3 的相互作用；还使用 TRPM3 选择性拮抗剂异樱花素（ISO）验证 TRPM3 在畏光中的作用。实验所用小鼠来自上海 SLAC 实验动物有限公司，分为多个队列，以减少实验偏差。

诱导 NEAT1 基因在畏光小鼠三叉神经节中的表达

RNA 测序分析显示，畏光小鼠三叉神经节中的 lncRNA 发生显著改变，共检测到 125 个差异表达的 lncRNA，其中 84.8%（106 个）呈上调趋势，NEAT1 便是其中之一（padj=0.0151）。qPCR 分析进一步证实了 NEAT1 RNA 水平的升高（P=0.0489），表明三叉神经节在畏光诱导后迅速激活，且 NEAT1 可能在此过程中扮演重要角色。

敲低 NEAT1 减轻小鼠的避光行为

通过尾静脉注射 shNEAT1-AAV9 载体实现 NEAT1 的全身性敲低。行为学实验表明，与对照组相比，敲低 NEAT1 的小鼠在畏光诱导后，在光区的总停留时间显著增加，避光行为明显减轻。组织学检查证实了 AAV 在三叉神经节中的有效感染，qPCR 显示 NEAT1 在敲低组中的表达水平显著低于对照组，进一步验证了 NEAT1 在畏光行为中的关键作用。

预测 NEAT1 调控的 ceRNA 网络

miRNA 测序和 qPCR 分析发现，畏光小鼠与对照组相比，有 7 个差异表达的 miRNA，其中 Mir-196a-1、Mir-196a-2 等下调。结合 RNA 测序数据和在线数据库，构建了包含 NEAT1、miR-196a-5p 和 10 个 mRNA 的 ceRNA 网络。Trpm3 因同时被 Mir-196a-1 和 Mir-196a-2 靶向，且其编码的 TRPM3 蛋白在三叉神经节功能中已有报道，成为重点研究对象。qPCR 验证了 Trpm3 等基因在畏光小鼠中的上调。

NEAT1 通过 miR-196a-5p/Trpm3 轴发挥作用

敲低 NEAT1 可导致三叉神经节中 miR-196a-5p 上调、Trpm3 下调，符合 ceRNA 理论预测。双荧光素酶报告基因实验证实，miR-196a-5p 可直接与 NEAT1 和 Trpm3 的 3′-UTR 结合，且结合位点在人和小鼠中高度保守。这表明 NEAT1 通过竞争性结合 miR-196a-5p，解除其对 Trpm3 的抑制，从而促进 Trpm3 表达。

TRPM3 抑制减轻畏光行为

腹腔注射 TRPM3 选择性拮抗剂 ISO 后，畏光小鼠在光区的停留时间恢复至接近对照组水平，证实 TRPM3 在维持三叉神经节敏化和畏光行为中起关键作用，进一步支持 NEAT1/miR-196a-5p/Trpm3 轴的调控机制。

研究结论表明，NEAT1 通过 NEAT1/miR-196a-5p/Trpm3 竞争性内源性 RNA（ceRNA）网络，在小鼠畏光行为中发挥关键促进作用。具体而言，偏头痛触发因素（如 UMB）可激活三叉神经节伤害感受器，诱导 NEAT1 和 Trpm3 表达，两者通过竞争结合 miR-196a-5p，促使 Trpm3 表达增加，进而通过钙离子内流和神经炎症维持三叉神经血管敏化，最终导致畏光行为。

尽管该研究为偏头痛畏光的机制提供了新见解，但仍存在一些局限性。例如，未在畏光模型中直接测量 NEAT1 与 miR-196a-5p 的相互作用，也未评估 TRPM3 蛋白的产生和活性，且研究仅在雄性小鼠中进行，未涉及雌性小鼠。未来需进一步探究 NEAT1 在不同细胞类型中的分布、NEAT1 与 miR-196a-5p 在 TRPM3 阳性神经元和卫星胶质细胞中的相互作用，以及 NEAT1 在其他偏头痛相关行为中的作用。尽管如此，该研究首次揭示了 lncRNA 在偏头痛畏光中的关键作用，为开发以 NEAT1 为靶点的偏头痛治疗方法奠定了基础，有望为众多受偏头痛畏光困扰的患者带来新的希望。