编辑推荐：
推荐
为解决多数单抗仅识别抗原一级结构、无法利用完整抗原致敏的问题，研究人员优化立体特异性靶向（SST）技术，经 DNA 和细胞免疫，针对 hEphA2 实现抗完整抗原和抗线性表位单抗的双重生成，为精准靶向治疗提供新策略。
论文解读
在生命科学与医学领域，单克隆抗体（单抗）因其靶向性成为疾病治疗的重要工具。然而，多数已获批单抗仅能识别抗原的一级结构（氨基酸序列），难以利用天然构象的完整抗原进行致敏，这限制了其在体内精准识别靶抗原天然构象（如二级、三级结构）的能力，尤其在肿瘤等疾病的分子靶向治疗中，无法充分发挥作用。例如，人类 Ephrin 型 - A 受体 2（hEphA2）作为受体型酪氨酸激酶（RTKs）家族成员，在乳腺癌、卵巢癌等多种肿瘤中高度过表达，其天然构象的精准识别对开发针对性治疗药物至关重要，但传统技术难以满足需求。
为突破这一瓶颈，研究人员围绕如何高效生成识别完整抗原构象的单抗展开研究。日本学者 Chiho Miyamae 等所在团队开发并优化了立体特异性靶向（SST）技术，相关成果发表于《Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects》。该研究旨在通过创新技术实现对完整抗原构象的特异性识别，为肿瘤等疾病的精准治疗提供更有效的工具。
关键技术方法
研究主要采用以下技术：
- DNA 免疫与细胞免疫：通过 DNA 序列导入和细胞抗原呈递，致敏 B 淋巴细胞，使其产生针对靶抗原的特异性免疫反应。
- B 细胞受体（BCR）筛选：利用表达靶抗原（hEphA2）的骨髓瘤细胞，通过 BCR 特异性结合并筛选致敏 B 淋巴细胞，确保所选 B 细胞携带识别完整抗原构象的受体。
- 电脉冲细胞融合：通过脉冲电场诱导筛选出的 B 细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，实现抗体分泌细胞的高效制备。
- 双标记免疫荧光分析：通过荧光标记抗体，验证 B 细胞与骨髓瘤细胞复合物的特异性结合及构象识别能力。
研究结果
验证 B 淋巴细胞筛选机制
通过双标记免疫荧光分析证实，表达 hEphA2 的骨髓瘤细胞可通过 BCR 以 1:1 比例特异性结合致敏 B 淋巴细胞，形成单一附着的细胞复合物，确认了完整抗原通过 BCR 对 B 细胞的严格筛选作用。
双重单抗生成能力
优化的 SST 技术不仅能生成识别 hEphA2 完整抗原构象的立体特异性单抗，还能产生识别其线性表位的一级结构特异性单抗。这一发现突破了传统技术仅能生成单一类型单抗的局限，为同时靶向抗原不同层面特征提供了可能。
复合物形成的精准控制
传统细胞融合中 “珍珠链” 状非特异性细胞接触问题被克服，优化技术通过严格控制 B 细胞与骨髓瘤细胞的特异性复合物形成，显著提高了分泌目标单抗的杂交瘤细胞生成效率。
结论与意义
研究证实，优化的 SST 技术通过 BCR 介导的完整抗原致敏 B 细胞筛选及精准细胞融合，实现了构象特异性与线性特异性单抗的双重生成。这一技术突破解决了传统单抗制备中对天然抗原构象识别不足的关键问题，为靶向膜蛋白（如 hEphA2）的肿瘤治疗提供了兼具构象和线性表位识别能力的新型工具。
该技术的应用前景广阔：一方面，构象特异性单抗可精准识别体内天然抗原结构，增强靶向治疗的特异性和疗效；另一方面，线性特异性单抗可作为补充，针对抗原一级结构发挥作用，两者结合可能开辟更全面的治疗策略。此外，DNA 与细胞免疫的联合应用简化了抗原制备流程，结合已知抗原序列信息，为快速开发针对多种膜蛋白的治疗性单抗提供了通用平台，有望推动肿瘤免疫治疗、精准医学等领域的发展。
研究通过严谨的技术优化和机制验证，为单抗药物开发提供了新范式，其双重靶向能力和高效筛选机制将助力解决当前靶向治疗中的关键挑战，具有重要的科学价值和临床转化潜力。
