Siglec-E与LOX-1受体互作调控细胞外小鼠Hsp70固有免疫炎症效应的分子机制

本研究揭示了细胞损伤相关分子模式mHSP70通过结合抑制性受体Siglec-E与激活型受体LOX-1形成的异源复合物，在树突状细胞脂筏微域中调控固有免疫应答的分子机制。研究人员发现Siglec-E能负向调节LOX-1介导的炎症激活，为理解自我分子如何抑制过度炎症反应提供了新维度，对自身免疫疾病和肿瘤免疫治疗具有重要启示。

　　

论文解读

在免疫系统中，如何区分"自我"与"非我"分子一直是核心科学问题。热休克蛋白70（HSP70）作为进化保守的分子伴侣，在细胞内发挥保护作用，但一旦释放到细胞外环境却展现出"双面性"——既能激活免疫反应，又能抑制炎症。这种矛盾现象背后的分子机制长期困扰着研究者，特别是小鼠模型中的调控机制尚未阐明。更关键的是，机体如何通过精确调控避免对HSP70产生过度炎症反应，这对理解自身免疫疾病和开发肿瘤免疫疗法具有重要意义。

由美国哈佛医学院附属贝斯以色列女执事医疗中心等机构的研究团队，在《Cell Stress and Chaperones》发表的研究中，首次揭示了小鼠HSP70（mHSP70）通过同时结合抑制性受体Siglec-E和激活型受体LOX-1形成异源复合物，在树突状细胞（DCs）膜脂筏微域中精细调控炎症反应的分子机制。研究人员采用CHO细胞转染模型、免疫共沉淀、共聚焦显微镜成像、分子对接模拟等技术，结合Siglec-E基因敲除小鼠的骨髓来源树突状细胞（BMDCs）实验，系统解析了受体互作网络及其功能影响。

2.1 细胞外mHSP70与Siglec-E相互作用
通过CHO-K1细胞转染实验证实mHSP70能特异性结合Siglec-E，免疫荧光显示二者共定位（Pearson相关系数0.792）。ELISA实验进一步验证这种结合不依赖糖基化修饰，因为质谱分析显示mHSP70不含N-聚糖，且不受PNGase F处理影响。

2.3 Siglec-E与LOX-1形成固有免疫受体复合物
免疫共沉淀实验在脾细胞裂解物中检测到Siglec-E与LOX-1的物理结合。CHO共转染实验发现LOX-1使Siglec-E在膜上形成聚集灶，流式检测显示约15% CD11c^hi DCs共表达两种受体。分子对接预测二者通过电荷互补相互作用：Siglec-E的ARG34、ARG75等正电荷残基与LOX-1的GLU112、GLU118等负电荷区域形成氢键。

2.5 mHSP70结合脂筏中的Siglec-E/LOX-1复合物
共聚焦显微镜观察到mHSP70与受体三元复合物共定位于膜脂筏（标记蛋白caveolin-1共定位系数0.757-0.911）。胆固醇清除剂MβCD处理可破坏该复合物稳定性，证实脂筏微环境对受体互作的关键作用。

2.6 Siglec-E调控LOX-1配体触发的树突状细胞成熟
在Siglec-E KO的BMDCs中，mHSP70或oxLDL刺激导致MHC II^hiCD86^hi成熟DCs比例显著增加（p<0.001）。磷酸化流式检测显示KO细胞基础p-Src水平升高而SHP-1降低，证实Siglec-E通过招募酪氨酸磷酸酶抑制LOX-1信号。

这项研究创新性地提出"配对受体协同识别"模型：mHSP70同时结合抑制性Siglec-E和激活型LOX-1，在DCs膜脂筏中形成信号整合平台。这种机制既能感知组织损伤释放的DAMPs（损伤相关分子模式），又通过抑制性受体防止过度炎症，为理解自身免疫耐受提供了新视角。从转化医学角度看，靶向调控该受体复合物可能成为炎症性疾病或肿瘤免疫治疗的新策略。研究还提示人类LOX-1可能与Siglec-7/9存在类似互作，这为后续研究指明了方向。