外周神经病变中SARM1依赖性免疫微环境的多细胞协同机制研究

本研究针对SARM1（Sterile alpha and toll/interleukin-1 receptor motif containing 1）激活导致的先天性神经病变，通过单细胞/核RNA测序技术揭示了外周神经中巨噬细胞、T淋巴细胞与修复性施万细胞（Repair SCs）的扩增，以及非免疫细胞（如内膜成纤维细胞）通过补体（C3/C1q）和趋化因子（Ccl9/Cxcl5）参与免疫招募的机制。创新性发现T细胞耗竭可逆转运动功能障碍，为SARM1依赖性神经退行性疾病提供了免疫调节治疗新靶点。

　　

论文解读

神经退行性疾病中，轴突退化是核心病理特征，而SARM1作为轴突退化的核心执行者，其激活会导致NAD⁺代谢紊乱并触发级联反应。尽管SARM1的细胞自主性作用已被广泛研究，但其如何通过非细胞自主机制驱动神经炎症仍不清楚。此前研究发现，在Nmnat2^V98M/R232Q小鼠模型（模拟人类先天性神经病变）中，巨噬细胞耗竭可缓解症状，暗示免疫系统参与疾病进程。然而，多种细胞类型如何协同建立致病性免疫微环境仍是未解之谜。

为解决这一问题，华盛顿大学的研究团队在《Journal of Neuroinflammation》发表研究，通过单细胞/核RNA测序（sc/snRNA-seq）结合流式细胞术和功能实验，系统解析了慢性SARM1激活下外周神经的细胞组成与转录重塑。研究发现，内膜成纤维细胞高表达补体成分（C3/C4b）和趋化因子（Ccl9/Cxcl5），而修复性施万细胞和Il1b⁺巨噬细胞亚群显著扩增，后者兼具吞噬功能与T细胞激活特性。更关键的是，T细胞耗竭可改善运动功能并减少轴突丢失，首次证实T细胞在SARM1依赖性神经病变中的致病作用。

关键技术方法
研究采用单细胞/核RNA测序分析2-3月龄Nmnat2^V98M/R232Q小鼠坐骨神经，结合CD45⁺免疫细胞分选和流式验证；通过RNA原位杂交（FISH）和多重免疫荧光（PhenoCycler）定位细胞特异性分子表达；利用抗CD4/CD8抗体耗竭T细胞3个月，评估行为学与轴突形态变化。

研究结果

1. 免疫细胞与修复性施万细胞的扩增
sc/snRNA-seq显示，sarmopathy小鼠神经中巨噬细胞和T细胞比例显著增加，同时出现表达Ngfr/Sox2的修复性施万细胞。内膜成纤维细胞转录组变化最显著，上调基因涉及免疫招募（如Ccl9、Cd97）和补体激活（C3、C4b）。

2. 细胞因子与补体的多细胞来源
趋化因子Cxcl14在施万细胞中表达升高，而补体C1q沉积于轴突周围。内膜成纤维细胞特异性高表达C3，通过RNA-FISH证实其与Pdgfra⁺细胞共定位，提示这些细胞通过补体途径放大免疫反应。

3. Il1b⁺巨噬细胞的致病特性
CD45⁺测序发现Il1b⁺巨噬细胞亚群扩增，其高表达吞噬相关基因（Cd300a）和T细胞激活标记（Cd44）。功能富集分析提示该亚群通过IL-1β（Interleukin-1 beta）促进炎症并激活T细胞。

4. T细胞的直接致病作用
免疫组化显示sarmopathy神经中CD3⁺/CD8⁺ T细胞和颗粒酶B（Granzyme B）增加。T细胞耗竭后，小鼠运动功能改善，轴突丢失减少50%，且CD68⁺巨噬细胞数量下降，证实T细胞-巨噬细胞轴协同驱动病变。

结论与意义
该研究首次揭示慢性SARM1激活通过多细胞网络（施万细胞、成纤维细胞、免疫细胞）建立神经炎症微环境。内膜成纤维细胞作为“免疫调节枢纽”分泌补体和趋化因子，Il1b⁺巨噬细胞促进T细胞活化，而T细胞直接加剧轴突损伤。这一发现不仅拓展了对SARM1依赖性神经病变机制的理解，更为联合靶向免疫细胞（如抗IL-1β或T细胞耗竭）与SARM1抑制剂的治疗策略提供了理论依据，对阿尔茨海默病、化疗性周围神经病变等具有广泛借鉴价值。