基于光谱与色谱联用技术的米拉贝隆(MIR)和他达拉非(TAD)组合疗法绿色分析方法开发及稳定性研究

本研究针对良性前列腺增生(BPH)和膀胱过度活动症(OAB)联合治疗中米拉贝隆(MIR)和他达拉非(TAD)组合药物的质量控制难题，开发了导数光谱(A/FF、R1D)和梯度洗脱HPLC两种绿色分析方法。通过ICH验证证实方法具有高灵敏度(LOD达10-3 μg/mL)和稳定性指示能力，经AGREE(0.66)、BAGI(75)等多维评估确认其环境友好性，并首次通过Way2drug平台验证无CYP450介导的药物相互作用(DDIs)，为临床组合用药提供安全可靠的分析方案。

　　

研究背景
良性前列腺增生(BPH)和膀胱过度活动症(OAB)如同中老年男性的"隐形枷锁"，80%的80岁以上男性受BPH困扰，而半数患者伴随OAB症状。当前临床采用他达拉非(TAD，PDE5抑制剂)联合米拉贝隆(MIR，β₃-AR激动剂)的"黄金组合"虽能缓解症状，却面临三大难题：缺乏同步检测方法、稳定性数据空白、潜在药物相互作用风险。更棘手的是，传统抗胆碱能药物组合会引发口干、便秘等副作用，而现有分析方法无法满足10:1(MIR:TAD)治疗比例下的精准检测需求。

研究开展
亚历山大大学药学院团队在《BMC Chemistry》发表突破性研究，首次建立导数光谱与HPLC联用的"双保险"分析体系。研究人员巧妙运用数学卷积技术——傅里叶函数变换(A/FF)和比值导数光谱(R¹D)破解光谱重叠难题，同时开发梯度洗脱HPLC方法(甲醇-磷酸盐缓冲液，pH7)，在Agilent Eclipse C₁₈柱上6分钟内完成分离(分辨率8.09)。通过强制降解实验(酸/碱/氧化/光解)验证方法稳定性指示能力，并采用AGREE、RGB12等工具进行绿色度评估。

关键技术

1. 光谱分析：水溶剂中采用导数变换(Δλ=2nm)和傅里叶卷积(8波长点)处理重叠光谱
2. HPLC优化：梯度洗脱(60→80%甲醇)结合三乙胺修饰，实现MIR(2.21min)与TAD(4.52min)基线分离
3. 绿色评估：通过12项AGREE指标和蜘蛛图对比水(4.16分)与甲醇(0.89分)的生态友好性
4. 安全性验证：基于Way2drug平台的CYP450代谢预测(IAP<-0.3)和不良反应概率分析(Pa<Pi)

研究结果
方法优化

• 导数光谱法：294nm处TAD的零交点实现MIR专属检测，R¹D法在246/258nm(MIR)和287/297nm(TAD)获最佳灵敏度
• HPLC方法：C₁₈(3.5μm)柱在pH7时分离效率最高(N=2505)，检测波长250nm(MIR)/225nm(TAD)

方法验证

• 线性范围：HPLC(0.65-100μg/mL)较光谱法(1-20μg/mL)宽100倍
• 灵敏度：HPLC的LOD达1.31×10^-3 μg/mL(MIR)，较光谱法低两个数量级
• 制剂分析：Bladogra^?与Diamorecta^?片剂回收率98.7-101.2%(RSD<2%)

稳定性研究

• MIR在酸碱条件下降解显著(58.5%酸解，47.2%碱解)，产生1-1.8min新峰
• TAD表现稳定，证实酰胺基团是MIR主要降解位点

可持续性评估

• 光谱法AGREE得分0.66(水溶剂)，HPLC法0.56(甲醇)
• BAGI实用性评分75分(HPLC)，RGB12综合白度85%

安全性验证

• CYP3A4/2D6等7种酶系IAP值均<-0.3，ORCA系统判定为5级(无相互作用)
• 心律失常等6类不良反应概率(Pa)均低于非活性概率(Pi)

结论与意义
该研究如同为BPH/OAB组合疗法装上了"智能监测系统"——通过数学光谱解析与绿色色谱技术的融合，不仅解决了10:1比例药物的同步检测难题，更揭示了MIR的pH敏感性降解特性。创新性地将人工智能预测引入分析方法开发，证实TAD+MIR无代谢冲突，为"多药联用"安全性评估树立新范式。AGREE与RGB12的双重认证使该方法成为可持续分析的典范，尤其在水溶剂光谱技术方面节省了80%有机试剂消耗。这些发现为优化药物制剂pH条件、制定存储规范提供了直接实验依据，推动BPH组合疗法从"经验用药"迈向"精准质控"新时代。