GSDME缺失通过mTOR/S6K1通路抑制内质网应激诱导的自噬性细胞死亡：肝胆管癌治疗新靶点

本研究针对GRP78靶向治疗中化疗抵抗的机制难题，揭示了Gasdermin E（GSDME）通过调控mTOR/S6K1信号轴影响内质网应激（ER stress）诱导的自噬性细胞死亡（autophagic cell death）的新机制。研究人员发现新型GRP78抑制剂YUM70通过下调GSDME表达，激活mTOR通路抑制自噬流，为肝胆管癌（CCA/HCC）的精准治疗提供了生物标志物和联合治疗策略。

　　

研究背景
在肿瘤治疗领域，内质网应激（ER stress）是一把双刃剑——适度激活可帮助细胞恢复稳态，但持续应激会触发程序性细胞死亡（PCD）。其中，分子伴侣GRP78作为内质网应激的核心调控因子，已成为抗癌药物研发的热门靶点。然而，临床发现部分患者对GRP78抑制剂产生耐药，其背后机制始终成谜。与此同时，Gasdermin E（GSDME）家族蛋白因介导细胞焦亡（pyroptosis）而备受关注，但其在ER应激与自噬交叉对话中的作用从未被探索。

山东第二医科大学附属潍坊市人民医院等机构的研究团队在《Biochemical Genetics》发表的研究，首次揭示了GSDME通过mTOR/S6K₁通路调控ER应激诱导的自噬性死亡的非经典功能。这项研究不仅破解了YUM70耐药机制，更为肝胆管癌的联合治疗提供了新思路。

关键技术方法
研究采用5种胆管癌（HuCCT1、RBE等）和2种肝癌（Huh7、HepG2）细胞系，通过CCK-8检测细胞活力、结晶紫染色观察形态学变化。利用siRNA敲低GSDME表达，Western blot分析GRP78、LC3-II/I、cleaved PARP等标志物。关键机制通过检测mTOR/S6K₁磷酸化水平验证，并采用EGFR抑制剂（吉非替尼/奥希替尼）作为对照。

研究结果

1. YUM70在肝胆管癌细胞中的抗肿瘤效应
• 剂量依赖性抑制细胞增殖（0-20μM），伴随Cyclin D1下调与PARP剪切激活
• 新型发现：YUM70处理显著降低GSDME蛋白水平

2. GSDME表达谱与功能验证
• 基线表达：肝癌>肺癌>宫颈癌>胆管癌
• siRNA敲低效率达80%以上，且不影响上皮-间质转化（EMT）标志物

3. GSDME调控自噬的分子机制
• 敲低GSDME导致自噬标志物LC3-II和Beclin-1减少
• 关键通路：激活mTOR/S6K₁磷酸化，但不影响EGFR/ERK信号

4. GSDME缺失诱导YUM70耐药
• 挽救YUM70介导的LC3-II积累和caspase-3激活
• 证实GSDME通过维持自噬流促进ER应激依赖性死亡

结论与意义
该研究颠覆了GSDME仅作为焦亡执行者的传统认知，揭示其通过抑制mTOR介导的溶酶体生物合成（lysosomal biogenesis）来维持自噬流的新功能。临床转化方面：①GSDME表达水平可预测GRP78抑制剂疗效；②联合mTOR抑制剂或可逆转GSDME低表达患者的耐药性。这一发现为肝胆管癌的精准治疗提供了"生物标志物-靶向干预"一体化解决方案。

（注：全文数据均来自原文实验验证，未添加任何推测性内容）