结肠癌患者T细胞亚群中VISTA表达的特征及其临床意义研究

本研究针对结直肠癌(CRC)免疫治疗响应率低的临床难题，由Assiut大学团队通过流式细胞术检测31例患者外周血(PB)及癌/癌旁组织中VISTA（免疫检查点分子）在CD4+/CD8+T细胞的表达特征。发现VISTA在CRC患者恶性组织中的表达显著高于正常组织及PB，提示其可能通过抑制T细胞功能参与肿瘤免疫逃逸，为开发新型VISTA靶向疗法提供了理论依据。

　　

论文解读

在肿瘤免疫治疗领域，结直肠癌(CRC)始终是块难啃的"硬骨头"。尽管PD-1/PD-L1抑制剂在多种癌症中展现出惊人疗效，但对CRC患者的响应率却令人失望。这种困境背后，是否隐藏着其他免疫检查点分子的"帮凶"？Assiut大学的研究团队将目光投向了VISTA（V-domain immunoglobulin suppressor of T cell activation）——这个在B7家族中独树一帜的免疫调节蛋白，正逐渐成为肿瘤免疫治疗的新靶点。

以往研究表明，VISTA可通过抑制T细胞活化参与肿瘤免疫逃逸，但其在CRC中的表达特征仍属未知。为此，Amira Gamal El Dein Badary领衔的研究团队开展了一项开创性工作，他们采用流式细胞术检测了31例CRC患者外周血、癌组织及癌旁正常组织中VISTA在CD4⁺（辅助性）、CD8⁺（细胞毒性）及CD4⁺CD8⁺（双阳性）T细胞亚群的表达模式，并与25例健康对照进行比较。

关键技术方法
研究团队建立了包含31例CRC患者和25例健康对照的队列，采集外周血样本并通过手术获取配对的癌/癌旁组织。采用多色流式细胞术（使用PE-Cy7标记抗VISTA、Percp标记抗CD4、APC标记抗CD8抗体）定量分析T细胞亚群及其VISTA表达。通过机械研磨法制备单细胞悬液，使用FACS Canto II/Navios EX流式细胞仪检测，数据经SPSS 29.0进行统计学分析。

主要研究发现

外周血T细胞亚群特征
CRC患者表现出显著的免疫失衡：CD4⁺T细胞比例较健康对照降低（31.55% vs 44.62%），而CD8⁺T细胞升高（23.78% vs 17.84%）。尤为关键的是，VISTA在CRC患者CD4⁺和CD8⁺T细胞的表达分别达13.23%和16.10%，显著高于健康对照的2.82%和4.12%，提示系统性免疫抑制状态。

组织特异性表达模式
恶性组织中VISTA表达呈现"梯度升高"现象：CD4⁺VISTA⁺（28.64%）、CD8⁺VISTA⁺（33.18%）和CD4⁺CD8⁺VISTA⁺（48.92%）均显著高于癌旁组织（16.62%、13.80%、14.86%）和自身外周血。这种"三高"特征（高表达、高梯度、高异质性）暗示VISTA可能是CRC局部免疫微环境的关键调控者。

临床相关性分析
虽然VISTA表达与TNM分期、肿瘤部位等常规临床参数无显著关联，但与部分实验室指标呈现有趣相关性：CD8⁺VISTA⁺细胞比例与CEA（癌胚抗原）水平正相关，CD4⁺VISTA⁺细胞则与血小板计数、血红蛋白等炎症指标相关，暗示其可能参与肿瘤相关系统性炎症反应。

研究结论与意义
该研究首次系统描绘了VISTA在CRC患者T细胞亚群中的表达图谱，揭示了三个重要生物学现象：空间异质性（组织>外周血）、亚群选择性（CD8⁺>CD4⁺）和双阳性T细胞的超表达特征。这些发现为理解CRC免疫逃逸提供了新视角——VISTA可能通过"三重屏障"机制发挥作用：在肿瘤局部形成免疫抑制微环境，在全身维持免疫耐受状态，并通过CD4⁺CD8⁺双阳性T细胞这一特殊群体增强抑制作用。

从转化医学角度看，该研究为CRC免疫治疗策略提供了重要启示：针对VISTA的阻断疗法可能与现有PD-1抑制剂产生协同效应，尤其对于免疫"冷肿瘤"患者。未来研究可进一步探索VISTA表达动态变化与治疗响应的关系，以及其与其它免疫检查点分子的交叉调控网络。论文发表于《Journal of the Egyptian National Cancer Institute》，为CRC精准免疫治疗增添了新的生物标志物候选。