mRNA疫苗与溶瘤病毒异源初免-加强策略协同克服肿瘤免疫抑制实现显著消退

这篇研究通过创新性联合mRNA疫苗（M22H04）与溶瘤病毒（OV/T22H07）的异源初免-加强策略，揭示了二者在激活系统性T细胞免疫（CD8+ T）与重塑肿瘤微环境（TME）中的互补机制。单细胞测序（scRNA-seq）证实OV显著增强细胞毒性T细胞浸润并极化中性粒细胞/巨噬细胞抗肿瘤表型，而mRNA疫苗优势激活外周抗原特异性免疫。该组合疗法在HPV相关癌症（E6+E7+）模型中实现80%完全缓解率，为突破晚期肿瘤免疫抑制提供了新范式。

　　

HPV免疫原表达溶瘤病毒的特性
研究团队构建了表达HPV16 E7-E6融合抗原的溶瘤疱疹病毒（oHSV-1/T22H07），通过删除病毒神经毒性基因ICP34.5并插入突变型E7/E6基因（消除致癌性），证实病毒在TC1小鼠肿瘤细胞中有效复制并分泌抗原。Western blot验证了免疫原表达，而PCR显示基因组改造成功。值得注意的是，T22H07在TC1细胞中的复制效率低于Vero细胞，暗示其肿瘤选择性。

溶瘤病毒的免疫原性与治疗效应
在TC1同源肿瘤模型中，瘤内注射T22H07引发假性进展后显著消退，35天存活率达90%。流式检测显示脾脏E7特异性CD8⁺ T细胞增加4倍，而对照病毒T22F05（无抗原表达）仅轻微激活免疫。通过MC38-E7模型进一步证实，OV裂解肿瘤细胞可释放内源性肿瘤抗原（如MC38抗原）和外源E7抗原，形成"原位疫苗"效应。手术切除后二次攻击实验显示，T22H07处理组完全抑制肿瘤复发和远端转移。

单细胞解析TME免疫重塑
scRNA-seq比较mRNA疫苗（M22H04）与T22H07对肿瘤浸润免疫细胞的影响：

• T/NK细胞：OV治疗组T&NK细胞占比达25.77%（mRNA组15.10%，PBS组5.21%），且细胞毒性CD8⁺ T细胞（高表达增殖基因）与肿瘤细胞的互作频率显著提升。
• 髓系细胞：OV特异性诱导促炎性中性粒细胞（高表达Ccl3/Ccl4等趋化因子）和M1型巨噬细胞（IL1b⁺IL6⁺），而mRNA组中性粒细胞以增殖前体为主。
• 检查点分子：OV组耗竭性CD8⁺ T细胞中CTLA4-CD86等免疫抑制配对显著上调，反映T细胞激活-耗竭的动态平衡。

外周与瘤内免疫的时空差异
尽管mRNA疫苗在脾脏诱导的E7特异性CD8⁺ T细胞是OV的10倍（ELISPOT验证），但瘤内流式显示OV更能富集E7⁺CD8⁺ T细胞。这种"外周激活-瘤内招募"的分工机制，解释了单一疗法在晚期肿瘤中的局限性。

异源联合治疗的协同效应
在TC1晚期模型中，mRNA初免（day4）联合OV加强（day9起3次瘤内注射）实现80%完全缓解，显著优于单药（OV组40%，mRNA组10%）。该方案通过mRNA建立系统性T细胞库，再经OV定向招募至肿瘤并逆转免疫抑制，其疗效依赖于严格的时间序列——反向序贯给药效果显著降低。

讨论与转化意义
研究创新性揭示了mRNA与OV的协同机制：mRNA擅长外周免疫激活，而OV通过病毒性炎症（如HSV-1诱导的Akt/GSK3通路激活中性粒细胞）和抗原扩散克服TME抑制。这种策略尤其适用于HPV相关恶性肿瘤（如宫颈癌），其临床转化价值已在多项联合检查点抑制剂的试验（如NCT0389788）中得到佐证。未来需优化OV载体以减少耗竭性T细胞比例，并探索在异质性更强肿瘤中的应用。