机械信号通过USP8介导的PD-L1和MHC-1泛素化降解调控前列腺癌免疫逃逸的机制研究

为解决前列腺癌(PCa)高Gleason评分组织免疫抑制微环境形成机制不明的问题，研究人员通过整合素β1/FAK/YAP轴揭示了机械信号通过USP8介导的K48/K63去泛素化调控PD-L1稳定性和MHC-1选择性自噬降解的分子机制，为USP8抑制剂联合免疫治疗提供新策略。

　　

前列腺癌作为男性最高发的恶性肿瘤，其高Gleason评分组织的免疫抑制特性与治疗抵抗一直是临床难题。既往研究发现这类肿瘤具有更硬的细胞外基质(ECM)特性，但机械信号如何驱动肿瘤进展和免疫逃逸的分子机制尚未阐明。福建医科大学附属第一医院徐乃进、薛学义团队在《Cell Death and Disease》发表的研究，首次揭示了ECM机械硬度通过USP8介导的双重去泛素化机制调控免疫检查点的全新通路。

研究采用临床样本分析、多硬度聚丙烯酰胺水凝胶(PAAG)模型构建、4D标记定量蛋白质组/泛素组分析等技术。通过77例前列腺癌组织弹性超声检测建立硬度与Gleason评分关联，利用2-57kPa梯度PAAG模拟不同ECM硬度，结合RNA测序和染色质免疫沉淀(ChIP)筛选关键靶点，并通过体内外泛素化实验验证分子机制。

高基质硬度促进PCa进展和免疫逃逸
通过Masson染色和超声弹性成像证实高Gleason评分组织胶原沉积增加、硬度升高。体外实验显示高硬度PAAG(53-57kPa)通过增强细胞增殖(CCK8/EdU)、抑制凋亡(流式细胞术)、促进EMT(E-cadherin下调)和CD8⁺T细胞杀伤抵抗(LDH释放实验)，构建了硬度依赖的恶性表型模型。

机械信号激活USP8转录
RNA-seq筛选发现USP8是YAP核心靶点。机制上，硬度通过整合素β1/FAK激活YAP核转位，TEAD2结合USP8启动子区域(-1987~-1978bp)驱动其转录。临床样本免疫组化显示USP8表达与Gleason评分呈正相关(r=0.72,P<0.001)。

USP8双重去泛素化调控免疫检查点
定量泛素组发现NBR1(K887)是USP8新型底物：①USP8通过K63去泛素化阻断TRIM21-P62/SQSTM1介导的自噬降解，延长NBR1半衰期(环己酰亚胺实验从6h延长至12h)；②NBR1作为自噬受体促进MHC-1通过LC3-II依赖性途径降解；③平行机制中，USP8通过K48去泛素化抑制PD-L1蛋白酶体降解。皮下成瘤实验证实USP8抑制剂DUBs-IN-2(3mg/kg)联合抗PD-L1可使肿瘤体积缩小62.3%。

该研究创新性揭示机械信号通过USP8"一箭双雕"调控免疫检查点的机制：上游整合素β1-FAK-YAP-TEAD2轴响应ECM硬度，下游USP8同时稳定PD-L1(K48)和NBR1(K63)，形成MHC-1低表达与PD-L1高表达的"冷肿瘤"特征。临床转化意义在于：①首次建立前列腺癌硬度-免疫逃逸评分系统；②证实USP8抑制剂可逆转硬度诱导的T细胞耗竭(流式显示CD8⁺GZMB⁺细胞增加2.1倍)；③为Gleason评分>7患者提供精准免疫治疗新靶点。研究存在的局限性包括PAAG二维模型与体内三维微环境差异，以及USP8抑制剂临床前数据仍需完善。