Taletrectinib通过抑制SRC/AKT/mTOR轴诱导结直肠癌焦亡的机制研究

为解决结直肠癌(CRC)术后耐药问题，成都医学院第一附属医院的研究团队通过体外细胞实验和小鼠模型，揭示了靶向药物Taletrectinib通过抑制SRC/AKT/mTOR信号通路激活caspase-3/GSDME依赖性焦亡(pyroptosis)的抗癌机制。该研究首次发现Taletrectinib对无ROS1/NTRK基因融合的CRC细胞仍具显著杀伤效果，为拓展该药物适应症提供了理论依据，相关成果发表于《Scientific Reports》。

　　

研究背景与意义
结直肠癌(CRC)作为全球第三大高发恶性肿瘤，其术后耐药问题长期困扰临床治疗。传统化疗药物面临疗效瓶颈，而靶向治疗受限于特定基因突变人群。近年来，一种名为焦亡(pyroptosis)的新型程序性细胞死亡方式引起关注——这种伴随炎症反应的裂解性死亡可通过gasdermin家族蛋白形成细胞膜孔洞，释放促炎因子激活免疫应答。然而，如何安全有效地诱导肿瘤细胞焦亡仍是未解难题。

研究设计与方法
成都医学院第一附属医院联合成都医学院的研究团队从441种焦亡化合物库中筛选出ROS1/NTRK抑制剂Taletrectinib，通过转录组测序确认HCT116和LOVO细胞株无ROS1/NTRK融合基因后，采用CCK8检测细胞活力、扫描电镜观察细胞形态、流式细胞术分析死亡类型、LDH释放实验验证膜完整性，并结合Western blotting检测关键蛋白表达。体内实验采用BALB/c-nude小鼠皮下移植瘤模型，通过免疫组化分析肿瘤组织变化。

主要研究结果

1. Taletrectinib抑制CRC细胞存活
   通过二次药物筛选发现Taletrectinib对CRC细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)为5μM。转录组测序证实其作用不依赖ROS1/NTRK靶点。

2. 诱导焦亡的特征验证
   药物处理后的细胞呈现典型焦亡形态：膜泡化（扫描电镜显示孔洞结构）、annexin V⁺/7-AAD⁺双阳性率升高（流式细胞术）、LDH释放量增加。Western blotting显示caspase-3活化、GSDME-N端片段积累及PARP切割。

3. SRC/AKT/mTOR通路的调控作用
   生物信息学预测SRC为关键靶点。实验证实Taletrectinib不改变SRC mRNA水平但降低其磷酸化，进而抑制下游AKT/mTOR信号。使用SRC激动剂tolimidone可逆转上述效应。

4. 动物模型验证
   小鼠移植瘤实验显示Taletrectinib组肿瘤体积/重量显著减小（下降约50%），伴随组织内caspase-3/GSDME-N表达上调及p-AKT/p-mTOR下调，该效应可被tolimidone部分抵消。

结论与展望
该研究首次阐明Taletrectinib通过非经典靶点SRC触发GSDME依赖性焦亡的双重机制：一方面通过caspase-3切割GSDME形成膜孔，另一方面抑制AKT/mTOR通路解除对细胞死亡的抑制。这一发现不仅为拓展Taletrectinib的适应症提供依据，更为克服CRC耐药性提供了新策略——利用现有靶向药物诱导焦亡可能成为"老药新用"的突破点。未来需进一步解析Taletrectinib与SRC蛋白的直接相互作用模式，并探索其与免疫治疗的协同效应。