miR-155-壳聚糖复合物靶向调控巨噬细胞免疫应答治疗硕大利什曼原虫感染的可行性研究

本研究针对硕大利什曼原虫（Leishmania major）感染中巨噬细胞免疫逃逸难题，开发了miR-155壳聚糖复合物（miR-155 CP）新型递送系统。通过体外实验证实，该复合物可显著上调miR-155表达（感染巨噬细胞中提升6倍），促进IL-12和NO分泌，使感染细胞死亡率提升至65.5±4.5%，为基于miRNA的利什曼病治疗提供了新策略。

　　

论文解读

在热带地区肆虐的利什曼病，每年威胁着全球数百万人的健康。这种由硕大利什曼原虫（Leishmania major）引发的寄生虫病，狡猾地劫持了人体免疫系统的"前线卫士"——巨噬细胞。更令人担忧的是，寄生虫竟能操控宿主细胞的微小RNA（miRNA）来瓦解防御工事，其中miR-155的异常表达与免疫失衡密切相关。当前治疗面临药物毒性大、耐药性攀升等困境，而传统疗法对巨噬细胞免疫调控的针对性不足。为此，来自首都医科大学的研究团队独辟蹊径，将目光投向了一种智能生物材料——壳聚糖（chitosan），试图通过其搭载miR-155基因武器，重编程巨噬细胞作战模式。

研究采用共凝聚法构建miR-155壳聚糖复合物（miR-155 CP），通过流式细胞术检测GFP报告基因评估转染效率，qPCR定量miR-155表达水平。利用感染L. major的RAW 264.7巨噬细胞模型，检测IL-12/IL-10细胞因子分泌、一氧化氮（NO）和尿素生成，并通过细胞凋亡分析验证治疗效果。

主要发现

1. 转染效率与miR-155表达调控
   通过优化制备工艺获得的纳米复合物粒径均一，转染48小时后GFP表达率达峰值。qPCR显示miR-155在健康巨噬细胞中上调20倍，在感染细胞中仍保持6倍增幅，且无显著细胞毒性。

2. 免疫调节效应
   治疗组IL-12分泌量显著增加，同时伴随NO产量上升——这两种分子正是巨噬细胞杀灭寄生虫的"生化武器"。有趣的是，促炎因子与抗炎因子IL-10的比值发生有利转变，暗示免疫平衡向清除感染的方向倾斜。

3. 细胞命运重塑
   最令人振奋的是，miR-155 CP使感染巨噬细胞的死亡率从对照组的25±5%飙升至65.5±4.5%。电镜观察显示典型的凋亡形态学特征，表明该治疗能精准识别并清除"叛变"的宿主细胞。

讨论与展望
这项发表于《Acta Tropica》的研究揭示了miR-155 CP的双重作战机制：一方面通过上调miR-155重编程巨噬细胞代谢（表现为NO和IL-12增加），另一方面选择性清除寄生虫的"避难所"。壳聚糖的黏膜粘附特性为后续开发皮肤利什曼病局部制剂提供了可能。值得关注的是，该策略避免了传统药物的全身毒性，其"智能激活"特性仅在感染部位发挥作用。未来研究需在动物模型中验证剂量效应，并探索与其他抗利什曼药物的协同作用。这项研究为发展基于宿主导向治疗（host-directed therapy）的抗感染策略提供了重要范式。