纳米颗粒靶向递送circTNK2反义寡核苷酸重塑他莫昔芬敏感性并增强NK细胞免疫治疗ER阳性乳腺癌

本研究针对ER阳性乳腺癌(ER+ BC)患者面临的内分泌治疗耐药难题，揭示了circTNK2通过编码C-TNK2-487aa蛋白和激活AKT-mTOR信号通路介导他莫昔芬(Tam)耐药及免疫逃逸的双重机制。研究人员开发了负载circTNK2反义寡核苷酸(ASOs)和CXCL10质粒DNA的ZIF-8纳米颗粒，成功恢复Tam敏感性并促进CD56+ NK细胞肿瘤浸润，为克服ER+ BC治疗耐药提供了创新策略。

　　

乳腺癌长期占据全球女性癌症发病率的首位，其中约70%属于雌激素受体阳性(ER⁺)亚型。他莫昔芬作为ER⁺乳腺癌内分泌治疗的基石药物，虽能显著降低30%-40%的复发和死亡风险，但获得性耐药问题日益凸显。既往研究多聚焦于ESR1基因突变和PI3K-AKT-mTOR通路异常，但肿瘤微环境中的免疫调节机制尚未阐明。与此同时，环状RNA(circRNA)作为新兴调控分子，其编码功能在癌症中的研究方兴未艾。南昌大学第一附属医院乳腺疾病中心的研究团队在《Cancer Letters》发表的重要成果，首次揭示了circTNK2通过"一RNA双机制"驱动ER⁺乳腺癌他莫昔芬耐药和免疫逃逸的创新理论，并开发出突破性的纳米靶向治疗策略。

研究团队采用circRNA测序筛选Tam耐药相关分子，通过临床样本分析、体外细胞实验和动物模型验证相结合的研究范式。关键技术包括：从209例乳腺癌患者队列中获取临床样本；构建Tam耐药MCF-7细胞系；应用质谱鉴定circRNA编码肽；采用RNA免疫共沉淀(RIP)和染色质免疫共沉淀(ChIP)分析蛋白互作；开发ZIF-8纳米颗粒靶向递送系统进行体内外干预。

【CircTNK2表达上调与他莫昔芬耐药相关】
通过对比3对Tam敏感/耐药ER⁺乳腺癌组织circRNA谱，发现hsa_circ_000937(命名为circTNK2)在耐药组显著上调。扩大样本验证显示，circTNK2高表达患者无进展生存期缩短40%，而线性TNK2 mRNA水平无变化。体外实验证实，circTNK2敲除使MCF-7 Re细胞对Tam敏感性恢复8.3倍。

【C-TNK2-487aa肽介导免疫逃逸】
质谱鉴定发现circTNK2编码487个氨基酸的新肽(C-TNK2-487aa)。该肽与STAT3结合促进其磷酸化(p-STAT3)，竞争性抑制STAT1同源二聚体形成，导致CXCL10表达下降72%。由此减少NK细胞向肿瘤的募集，CD56⁺细胞浸润降低5.8倍。

【circTNK2/SRSF1轴激活AKT-mTOR通路】
RNA结合蛋白免疫沉淀显示circTNK2特异性结合剪接因子SRSF1，激活AKT(Ser473)和mTOR磷酸化，促使ER⁺ BC细胞获得Tam耐药性。双荧光素酶报告基因证实该机制独立于其编码肽功能。

【纳米颗粒靶向治疗策略】
设计包载circTNK2 ASOs和CXCL10质粒的ZIF-8纳米颗粒，在PDX模型中使肿瘤体积缩小68%，NK细胞浸润增加4.2倍，且显著降低p-STAT3/STAT1比值。该联合方案较单药治疗增效3.5倍。

该研究创新性揭示circTNK2通过"RNA-蛋白"双机制协调ER⁺乳腺癌的内分泌耐药和免疫抑制微环境：其编码肽C-TNK2-487aa干扰STAT1/STAT3平衡抑制CXCL10分泌，同时circTNK2 RNA支架功能激活AKT-mTOR通路。研究开发的靶向纳米递送系统突破核酸药物体内输送瓶颈，为临床逆转Tam耐药提供"一石二鸟"的治疗新范式。这不仅深化了对circRNA编码功能的认识，更开创了联合调控肿瘤内在信号和免疫微环境的协同治疗策略，具有重要的转化医学价值。