肠道微生物通过减轻 X 射线诱导的 DNA 损伤提升苹果蠹蛾雄性交配竞争力

【字体: 时间:2025年05月26日 来源:Environmental Technology & Innovation 6.7

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  【编辑推荐】为探究 X 射线辐照导致昆虫不育及交配竞争力下降的机制,研究人员以苹果蠹蛾(Cydia pomonella)为对象,分析辐照对其 DNA 损伤修复及肠道微生物的影响。发现补充Stenotrophomonas可增强辐照雄虫交配竞争力,为提升 rSIT 技术 efficacy 提供新方向。

  在农业害虫防控领域,利用 sterile insect technique(SIT,不育昆虫技术)通过释放辐照不育雄虫抑制害虫种群数量是一种环保高效的策略。然而,X 射线辐照在诱导昆虫不育的同时,常导致雄虫交配竞争力下降,使得需释放更高比例的不育雄虫才能达到防控效果,这一问题长期制约着 SIT 技术的应用效率。以全球重要的水果害虫苹果蠹蛾(Cydia pomonella)为例,其在加拿大奥肯那根 - 库特内地区通过基于 X 射线的 rSIT(radiation-based SIT)策略虽成功被扑灭,但研究发现,200 Gy 辐照剂量虽能实现不育,却使雄虫交配竞争力显著降低,需 6:1 的不育雄虫与野生雄虫比例才能有效控制种群。因此,揭示辐照诱导不育和交配竞争力下降的机制,成为提升 rSIT 技术效能的关键科学问题。
为解决这一难题,国内研究人员开展了相关研究,旨在明确 X 射线辐照对苹果蠹蛾 DNA 损伤与修复的影响,以及肠道微生物在其中的作用。该研究成果发表在《Environmental Technology》,为解析辐照胁迫下昆虫的适应机制及优化 SIT 应用提供了重要依据。

研究人员主要采用了以下关键技术方法:通过随机扩增多态性 DNA(RAPD)分析检测基因组模板稳定性(GTS)以评估 DNA 损伤程度;利用 RT-qPCR 技术定量分析 DNA 损伤响应(如ATMATRCHK2)和修复相关基因(如JNKP38Ku70Ku80)的表达变化;借助 16S rRNA 测序解析辐照前后肠道微生物组成的差异;通过回补培养分离的肠道菌株,结合交配竞争力实验(如计算竞争力指数 CI)验证关键微生物的作用。

3.1 200 Gy X 射线辐照导致苹果蠹蛾基因组 DNA 损伤


利用 8 条 RAPD 引物对辐照组和对照组的基因组 DNA 进行扩增,发现辐照组(200 Gy)雄虫的 GTS 值显著下降至对照组的 86.57%,且在成虫期(1、3、5 天)GTS 波动变化,表明辐照诱导了持续的 DNA 损伤,而修复机制未能完全恢复基因组稳定性。

3.2 辐照通过调控损伤相关基因表达引发 DNA 损伤


RT-qPCR 结果显示,辐照后ATMATR基因在蛹期和成虫初期(A1D)表达显著下调,而CHK2在 A1D 期上调,随后在 A5D、A7D 期下调。这表明辐照可能通过抑制上游损伤感应基因,影响 DNA 损伤响应通路的及时激活,导致修复滞后。

3.3 损伤修复过程响应 200 Gy X 射线诱导的损伤


MAPK 信号通路中的JNKP38ERKP53Ku80等修复相关基因在辐照后呈现动态表达变化。例如,JNKP38在 A1D 期显著上调,提示 MAPK 通路在辐照后的损伤修复中起关键作用,而Ku80的激活表明非同源末端连接(NHEJ)修复机制被启动。

3.4 16S rRNA 测序揭示 X 射线辐照对苹果蠹蛾肠道微生物组成的影响


测序分析显示,200 Gy 辐照显著改变了肠道微生物的组成,蛹期和成虫期的优势菌科(如假单胞菌科、黄单胞菌科)丰度发生变化,且功能富集分析表明辐照影响了微生物的 DNA 复制修复、能量代谢及碳水化合物代谢功能。辐照后部分菌群(如芽孢杆菌、乳杆菌属)的丰度变化与损伤修复基因表达呈正相关。

3.5 肠道微生物与 X 射线诱导的 DNA 损伤修复的功能相关性分析


相关性分析发现,蛹期的芽孢杆菌、乳杆菌属等与 DNA 修复功能显著相关,成虫期的伯克霍尔德氏菌、葡糖杆菌等与代谢功能相关。其中,葡糖杆菌(Gluconobacter)与ATMATR基因表达呈正相关,提示其可能参与损伤感应过程。

3.6 Stenotrophomonas增强不育苹果蠹蛾雄虫的交配竞争力


通过分离培养,发现回补Stenotrophomonas可显著上调辐照雄虫的ATMATRCHK2等损伤响应基因及JNKP38Ku80等修复基因的表达,并使交配竞争力指数(CI)从 0.049 提升至 0.195,证实该菌是提升辐照雄虫交配竞争力的关键微生物。

研究结论表明,X 射线辐照通过诱导苹果蠹蛾 DNA 损伤并干扰肠道微生物组成,双重机制导致雄虫交配竞争力下降。而关键肠道菌Stenotrophomonas可通过激活 ATM/ATR-CHK2 信号通路及 MAPK 修复通路,增强辐照雄虫的 DNA 修复能力,进而提升其交配竞争力。该研究首次揭示了肠道微生物在昆虫应对辐照胁迫中的关键作用,为优化 rSIT 技术提供了新策略,即通过人为调控肠道微生物组成(如补充有益菌),在保证不育效果的同时提升辐照雄虫的交配竞争力,减少释放剂量,降低防控成本。这一发现不仅深化了对辐照胁迫下昆虫 - 微生物互作机制的认识,也为其他害虫的生物防治提供了重要借鉴,推动了 SIT 技术向更高效、可持续的方向发展。

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