基于LC-MS与分子对接技术揭示鸡血藤黄酮通过调控RhoA/ROCK通路缓解原发性痛经的分子机制

本研究针对原发性痛痛经（PD）治疗机制不明的科学问题，通过建立离体子宫收缩模型和PD大鼠模型，结合LC-MS成分分析、网络药理学及分子对接技术，首次系统阐明鸡血藤黄酮（SCF）通过抑制RhoA/ROCK信号通路、调节PGF2α/PGE2比值及Ca2+/NO水平发挥解痉作用，为中药治疗PD提供了新靶点和理论依据。

　　

原发性痛经（Primary Dysmenorrhea, PD）作为困扰全球60%-90%育龄女性的常见妇科疾病，其核心病理机制涉及子宫过度收缩和局部缺血，现有治疗方案存在副作用明显和靶向性不足等局限。传统中药鸡血藤（Spatholobi Caulis）在民间长期用于缓解痛经，但其活性成分及分子机制始终未能明确。这一科学问题的破解，不仅关乎中医药现代化进程，更为开发新型靶向药物提供了可能。

中国某研究机构的研究团队在《Fitoterapia》发表的研究中，通过创新性整合多学科技术手段，首次系统揭示了鸡血藤黄酮（SCF）治疗PD的分子靶标和通路机制。研究采用离体子宫收缩实验和PD大鼠模型验证药效，结合液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）鉴定出11种黄酮类成分，运用网络药理学锁定RhoA/ROCK等关键通路，并通过分子对接证实10种成分与RhoA的强结合能力。最终通过qPCR和Western blot验证了SCF对CALM、RhoA、ROCK1等靶点的调控作用。

关键技术包括：1）建立雌激素联合催产素诱导的PD大鼠模型；2）LC-MS鉴定SCF化学成分；3）网络药理学预测RhoA/ROCK等核心靶点；4）分子对接评估化合物-靶点结合活性；5）qPCR和Western blot验证通路调控。

【SCF抑制子宫收缩的药效验证】
离体实验显示SCF使子宫平滑肌张力降低62.07%，动物实验证实其显著改善PD大鼠扭体反应，并将异常升高的PGF2α/PGE2比值恢复至正常水平，同时降低NO和Ca²⁺浓度。

【活性成分鉴定与靶点预测】
LC-MS分析初步推断出11种黄酮成分，网络药理学筛选出RhoA、VEGFA、PIK3CA等核心靶点，分子对接显示10种成分与RhoA结合能低于-5 kcal/mol。

【RhoA/ROCK通路调控机制】
SCF显著下调RhoA、ROCK1、PIK3CA和AKT的mRNA及蛋白表达，同时调控VEGFA、IP3R（肌醇三磷酸受体）、MLCK（肌球蛋白轻链激酶）和NOS3（内皮型一氧化氮合酶）相关基因表达。

该研究创新性提出SCF通过多靶点协同作用缓解PD的机制：一方面通过抑制RhoA/ROCK通路降低子宫平滑肌过度收缩，另一方面通过调节PGF2α/PGE2平衡和Ca²⁺/NO水平改善子宫微循环。这不仅为中药现代化研究提供了"成分-靶点-通路"的完整证据链，更揭示了RhoA/ROCK通路作为PD治疗新靶点的临床价值。研究采用的LC-MS与计算生物学相结合的策略，也为其他中药复杂体系的机制研究提供了方法论参考。