华蟾素通过VEGFa/VEGFR2自分泌信号通路抑制肝癌EMT样干性及转移的机制研究

肝癌(HCC)作为高转移性恶性肿瘤，其治疗面临重大挑战。本研究聚焦VEGFa/VEGFR2自分泌通路在肝癌转移中的作用，发现传统中药华蟾素(CBG)能通过抑制该通路，阻断PI3K/AKT依赖的上皮-间质转化(EMT)过程，显著降低Huh7细胞的迁移、侵袭和肿瘤球形成能力。动物实验证实CBG可抑制移植瘤生长并下调VEGFa分泌，为肝癌靶向治疗提供了新策略。

　　

肝癌是全球致死率最高的恶性肿瘤之一，其5年生存率长期徘徊在低位，主要归因于肿瘤的高转移特性。上皮-间质转化(EMT)作为肿瘤转移的关键环节，能赋予癌细胞迁移侵袭能力，而血管内皮生长因子(VEGFa)与其受体VEGFR2的结合可激活PI3K/AKT等多条信号通路。传统研究多聚焦于VEGF/VEGFR2的旁分泌作用，但近年发现肿瘤细胞自身也可形成VEGF/VEGFR2自分泌环，这为肿瘤治疗提供了新思路。

安徽中医药大学的研究团队在《Discover Oncology》发表重要成果，首次揭示中药华蟾素(CBG)可通过阻断VEGFa/VEGFR2自分泌通路抑制肝癌转移。研究人员采用CCK-8检测细胞活力，Transwell实验评估迁移侵袭能力，免疫荧光双染验证VEGFa/VEGFR2共定位，结合Western blot分析信号通路蛋白表达，并通过裸鼠移植瘤模型进行体内验证。

CBG抑制Huh7细胞增殖、迁移及肿瘤球形成能力
剂量依赖性实验显示，CBG处理12/24/48小时的IC₅₀分别为10.08/6.142/1.484 mg/ml。EdU实验证实6 mg/ml CBG可显著抑制细胞增殖，Transwell显示迁移细胞数减少50%以上，肿瘤球形成数量下降60%，提示CBG能削弱肝癌细胞的干性特征。

VEGFa/VEGFR2自分泌通路调控PI3K/AKT依赖性转移
免疫荧光首次在Huh7细胞质中发现VEGFa与VEGFR2共定位。使用VEGFR2抑制剂阿帕替尼处理后，细胞迁移侵袭能力降低40%，同时Western blot显示p-PI3K和p-AKT表达下调，EMT标志物E-cadherin上升而N-cadherin/vimentin下降，证实该通路通过PI3K/AKT调控EMT进程。

CBG通过靶向自分泌通路抑制肝癌转移
裸鼠实验中，CBG治疗组肿瘤体积缩小35%，血清VEGFa水平降低42%。分子机制研究表明，CBG可同步下调VEGFa/VEGFR2通路活性、抑制PI3K/AKT磷酸化，并逆转EMT相关蛋白表达，而EGFR蛋白未见明显变化，说明其特异性作用。

该研究创新性发现肝癌细胞存在VEGFa/VEGFR2自分泌环，阐明CBG通过"自分泌通路-PI3K/AKT-EMT"轴抑制转移的分子机制。这不仅为中药抗肿瘤提供了科学依据，更为研发靶向肿瘤自分泌信号的治疗策略开辟了新途径。研究采用的移植瘤模型与临床相关性高，所发现的生物标志物对肝癌预后评估具有潜在价值。未来可进一步探索CBG与其他靶向药物的联用效果，推动其临床转化应用。