载脂蛋白 A-1 反义 RNA 通过靶向微小 RNA-185 加剧动脉粥样硬化的机制研究

为探究长链非编码 RNA（lncRNA）载脂蛋白 A-1 反义 RNA（APOA1-AS）在动脉粥样硬化（AS）中的作用，研究人员检测其及微小 RNA-185（miR-185）在血清和细胞模型中的表达。发现 APOA1-AS 可通过海绵吸附 miR-185 调控血管平滑肌细胞功能，为 AS 治疗提供新靶点。

　　本研究旨在探究长链非编码 RNA（lncRNA）载脂蛋白 A-1 反义 RNA（APOA1-AS）在动脉粥样硬化（AS）患者血清及 AS 细胞模型中的表达情况，及其对细胞增殖、凋亡的影响与潜在机制。研究纳入 20 名经血管造影证实的冠状动脉粥样硬化患者（狭窄≥50%，未治疗），排除合并症（高血压、糖尿病、器官功能障碍或肿瘤）。采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测 AS 患者和健康对照血清中 APOA1-AS 和微小 RNA-185（miR-185）水平。通过用 100 mg/L 氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理人平滑肌细胞（HASMCs）24 小时构建 AS 细胞模型。对细胞进行 APOA1-AS 小干扰 RNA（si-APOA1-AS）、miR-185 模拟物及 si-APOA1-AS 转染，随后进行 ox-LDL 处理。采用细胞计数试剂盒 - 8（CCK8）分析细胞增殖，流式细胞术和蛋白质免疫印迹法检测细胞凋亡。荧光素酶报告基因实验证实 APOA1-AS 与 miR-185 的相互作用。结果显示，AS 患者中 APOA1-AS 和 miR-185 水平显著高于对照组（P＜0.001）。在 ox-LDL 处理的 HASMCs 中，APOA1-AS 和 miR-185 表达增加（P＜0.001）。APOA1-AS 敲低或 miR-185 过表达可减少增殖和凋亡，降低 Caspase3 和 Bax 水平，升高 Bcl-2 水平（P＜0.001）。APOA1-AS 可干预 miR-185 的表达（P＜0.001），并作为分子海绵直接结合 miR-185。本研究确定 APOA1-AS 为新型 AS 生物标志物，并证明其通过海绵吸附 miR-185 在血管平滑肌细胞（VSMC）功能障碍中起致病作用。APOA1-AS/miR-185 轴将脂质代谢与 VSMC 重塑联系起来，为斑块稳定提供了双靶点策略。