NOTCH1抑制增强三阴性乳腺癌免疫原性并协同免疫检查点抑制剂的机制研究

针对三阴性乳腺癌(TNBC)免疫治疗响应率低的难题，研究人员通过靶向NOTCH1信号通路，发现其抑制可显著增强肿瘤细胞免疫原性(ICD)、促进抗原呈递相关分子(MHC-I)表达，并诱导细胞衰老及干扰素分泌(SASP)。该研究揭示了ATM依赖的免疫调控机制，为NOTCH1抑制剂联合免疫检查点抑制剂(ICIs)的临床转化提供了新策略。

　　

三阴性乳腺癌(TNBC)因缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达，治疗选择有限。尽管免疫检查点抑制剂(ICIs)为TNBC带来希望，但"冷肿瘤"特性导致的淋巴细胞耗竭和低浸润仍是主要障碍。NOTCH1信号通路在TNBC中过度激活，但其调控肿瘤免疫原性的机制尚不明确。

沈阳药科大学的研究团队在《Breast Cancer Research》发表的研究中，通过生物信息学分析、shRNA基因沉默、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)处理、流式细胞术检测CALR暴露和MHC-I表达、ATP释放测定、SA-β-gal衰老染色等技术手段，结合4T1-NICD小鼠模型和肿瘤疫苗接种实验，系统阐明了NOTCH1抑制通过ATM/p53/p21通路诱导细胞衰老，促进I/III型干扰素分泌，从而增强抗原呈递和免疫原性的分子机制。

研究结果显示：NOTCH1在TNBC临床样本和细胞系中高表达且预后不良。通过shRNA或DAPT抑制NOTCH1后：1) 抗原呈递相关基因B2M、TAP1/2表达上调，MHC-I分子表面暴露增加；2) 免疫原性细胞死亡(ICD)标志物钙网蛋白(CALR)膜转位、ATP释放及内质网应激(ER stress)信号(p-IRE1α/p-eIF2α)激活；3) 细胞衰老特征显著，伴随p53/p21上调和衰老相关分泌表型(SASP)产生，特别是I型(IFN-β)和III型干扰素(IFN-λ2)；4) ATM激酶磷酸化是NOTCH1调控免疫原性的关键节点，免疫共沉淀证实NOTCH1通过直接结合ATM抑制其活性。

在动物实验中，DAPT处理的4T1-NICD细胞作为疫苗可有效预防肿瘤发生。联合PD-1/PD-L1抑制剂BMS-1显著抑制肿瘤生长，并增加CD8⁺/CD4⁺ T细胞浸润。该效应可被ATM抑制剂KU-60019或IFNAR抗体逆转，证实了ATM-IFN轴的核心作用。

这项研究创新性地揭示了NOTCH1-ATM-干扰素轴在TNBC免疫调控中的核心地位，为克服ICIs耐药提供了新思路。通过将NOTCH1抑制剂从传统的"促凋亡药物"重新定义为"免疫微环境调节剂"，为临床开发DAPT等γ-分泌酶抑制剂与ICIs的联合方案奠定了理论基础。值得注意的是，研究同时指出GSIs可能引起肠道毒性等副作用，提示未来需开发更具选择性的NOTCH1靶向药物。这些发现不仅适用于TNBC，对其它NOTCH1高表达的"冷肿瘤"也具有重要参考价值。