LDHA 介导的 YAP 乳酰化通过诱导 YAP 去磷酸化激活促进肝细胞癌肿瘤进展

为探明 YAP 在肝细胞癌（HCC）中的作用机制，研究人员围绕 LDHA 调控的乳酸生成展开研究。发现 LDHA 通过增加乳酸水平激活 YAP 通路，乳酸处理可抑制 YAP Ser127磷酸化，YAP K102乳酰化拮抗 Ser127磷酸化。为 HCC 治疗提供新靶点。

　　在全球癌症舞台上，肝细胞癌（HCC）堪称 “狠角色”，它不仅发病率和死亡率居高不下，很多患者确诊时已到晚期，治疗效果差。这背后，YAP（Yes-Associated Protein，一种 Hippo 通路效应因子）虽被发现与 HCC 进展有关，但具体机制却像蒙上了一层迷雾。为拨开这层迷雾，南昌医学院第二附属医院、江西省肿瘤医院等机构的研究人员展开了深入研究，相关成果发表在《Biology Direct》。

研究人员主要运用了基因编辑技术（如构建 LDHA 过表达和敲除细胞系、YAP 稳定沉默细胞系）、分子生物学技术（Western blot 检测蛋白表达及磷酸化水平、Co-IP 检测蛋白乳酰化）、细胞功能实验（MTT 法检测细胞活力、Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力）、动物模型（裸鼠异种移植模型）以及生物信息学分析（利用 TCGA 数据库分析基因表达与患者预后的关系）等技术方法。

LDHA 调控的乳酸生成促进 HCC 中 YAP 激活和恶性表型

研究人员通过在 HepG2 和 Huh7 细胞中过表达 LDHA，发现乳酸水平升高，YAP 通路激活，表现为 p-LATS1 表达减少、YAP Ser¹²⁷磷酸化降低、总 YAP 和 TAZ 表达升高，细胞增殖、迁移和侵袭能力增强。而 LDHA 敲除则导致乳酸生成减少，YAP 通路抑制。用 LDH 抑制剂草氨酸盐处理后，可逆转 LDHA 过表达对 YAP 通路的激活作用及细胞恶性表型，表明 LDHA 通过调控乳酸生成激活 YAP 通路，促进 HCC 恶性进展。

乳酸通过抑制 YAP Ser¹²⁷磷酸化激活 YAP 通路促进 HCC 细胞恶性表型

不同浓度乳酸处理 HCC 细胞实验显示，乳酸能浓度依赖性地促进细胞活力、迁移和侵袭，抑制细胞凋亡。机制上，乳酸可增加总 YAP 表达，减少 YAP Ser¹²⁷磷酸化，促进 YAP 核定位，激活 YAP 靶基因 FGF1、CTGF、SOX2 的表达，表明乳酸通过抑制 YAP Ser¹²⁷磷酸化激活 YAP 通路，进而促进 HCC 细胞恶性表型。

乳酸通过 YAP 激活加速 HCC 异种移植模型中的肿瘤生长

在裸鼠异种移植模型中，乳酸处理可显著增加肿瘤重量和直径，促进 Ki67 阳性增殖细胞增多和 YAP 蛋白表达，抑制肿瘤细胞凋亡。而 YAP 沉默则抑制肿瘤生长，且乳酸可部分逆转 YAP 沉默对肿瘤生长的抑制作用，证实乳酸在体内通过激活 YAP 促进 HCC 肿瘤生长。

YAP K¹⁰²乳酰化通过拮抗 Ser¹²⁷磷酸化激活 YAP 通路促进 HCC 恶性表型

研究发现，乳酸处理可浓度依赖性地增加 YAP 乳酰化水平，预测并验证 YAP K¹⁰²为乳酰化位点。YAP K¹⁰²突变可减少乳酸诱导的 YAP 乳酰化，增加 YAP Ser¹²⁷磷酸化，抑制 YAP 核定位及细胞恶性表型，表明 YAP K¹⁰²乳酰化通过拮抗 Ser¹²⁷磷酸化激活 YAP 通路，促进 HCC 恶性进展。

本研究揭示了 YAP 乳酰化在 HCC 中的重要作用，阐明了 LDHA - 乳酸 - YAP 乳酰化 - Ser¹²⁷磷酸化这一调控轴在 HCC 进展中的机制。这不仅丰富了人们对 HCC 发病机制的认识，也为 HCC 的治疗提供了新的潜在靶点，如 LDHA、YAP 乳酰化位点等，有望为 HCC 患者带来新的治疗希望。同时，研究也为探索其他肿瘤中代谢异常与蛋白翻译后修饰的相互作用提供了借鉴。