不可逆性牙髓炎中PANoptosis（泛凋亡）通路的激活机制：基于人组织样本的体外研究

本研究针对牙髓炎中细胞死亡通路的交互机制，通过整合RNA-seq重分析、qRT-PCR验证及scRNA-seq技术，首次揭示炎症牙髓组织中凋亡（apoptosis）和焦亡（pyroptosis）的独立激活模式，否定了PANoptosis（泛凋亡）的存在，为牙髓炎免疫调控提供新视角。

　　

牙髓炎是口腔常见疾病，通常由细菌感染引发，若不及时治疗可能导致组织坏死。近年来，调控性细胞死亡（Regulated Cell Death, RCD）在炎症中的作用备受关注，尤其是凋亡（apoptosis）、焦亡（pyroptosis）和坏死性凋亡（necroptosis）的交互关系。尽管既往研究在牙髓炎中检测到这三种通路的存在，但它们是否以“PANoptosis”（泛凋亡）——一种由多分子复合物PANoptosome协调的协同死亡形式——发挥作用仍未知。这一问题对理解牙髓炎的免疫病理机制至关重要。

南方医科大学南方医院的研究团队通过整合生物信息学与实验验证，首次系统评估了牙髓炎中PANoptosis的激活状态。研究利用公共数据库GSE92681的RNA-seq数据重分析，结合qRT-PCR、免疫印迹（Immunoblotting）和免疫共沉淀（Co-IP）技术，检测了健康与炎症牙髓组织中关键分子表达；进一步通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）解析了caspase-8、PYCARD（ASC）和RIPK1的细胞分布。样本来源于临床拔除的第三磨牙（健康组3例，炎症组取自龋坏牙齿）。

研究结果

1. PANoptosis相关基因表达谱：RNA-seq分析显示，炎症牙髓中NLRP3、AIM2等炎症小体组分及凋亡效应分子caspase-3表达上调，但坏死性凋亡关键蛋白MLKL未激活。
2. 通路激活验证：免疫印迹证实凋亡（caspase-3剪切）和焦亡（GSDMD活化）通路激活，而necrosome复合物（RIPK1/RIPK3/MLKL）未形成。
3. 分子互作分析：Co-IP未检测到caspase-8与PYCARD的相互作用，提示PANoptosome未组装。
4. 单细胞分布特征：scRNA-seq显示caspase-8主要富集于T细胞，PYCARD广泛表达于单核细胞和树突状细胞，RIPK1无细胞特异性，表明通路激活具有细胞类型异质性。

结论与意义
研究表明，牙髓炎中凋亡和焦亡独立激活于不同细胞群体，而非以PANoptosis形式协同作用。这一发现挑战了感染性疾病中细胞死亡通路必然交互的传统认知，为牙髓炎的精准免疫干预提供理论依据。例如，针对单核细胞中PYCARD的调控或可特异性抑制焦亡相关炎症损伤。论文发表于《Archives of Oral Biology》，为口腔免疫领域贡献了首个PANoptosis的否定性证据，推动了对RCD网络复杂性的理解。