基于微滴数字PCR技术的口腔癌患者TP53密码子72多态性无创唾液检测研究

本研究针对口腔癌(OC)患者TP53基因c.215C>G(p.Pro72Arg)多态性检测的临床需求，开发了基于微滴数字PCR(ddPCR)技术的唾液cfDNA检测方法。通过对33例患者样本分析，发现C/G(45.5%)、G/G(36.3%)和C/C(18.2%)三种基因型分布，结果与组织DNA检测一致，为口腔癌无创诊断提供了新策略。

　　

口腔癌是全球十大高发癌症之一，在印度等南亚国家尤为严重，占该国所有癌症病例的13.6%。这种高发病率与长期咀嚼槟榔、吸烟等习惯密切相关。然而，传统组织活检的侵入性和早期症状隐匿性导致诊断困难，亟需开发无创检测方法。肿瘤抑制基因TP53作为口腔癌中最常突变的基因之一，其密码子72多态性(c.215C>G)与疾病发生发展密切相关。

印度NITTE（视为大学）的研究团队创新性地利用微滴数字PCR(ddPCR)技术，对33例口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者的唾液细胞游离DNA(scfDNA)进行TP53密码子72多态性分析。研究发现C/G(Pro/Arg)、G/G(Arg/Arg)和C/C(Pro/Pro)基因型分别占45.5%、36.3%和18.2%，与肿瘤组织DNA检测结果高度一致。该成果发表于《Gene Reports》，为口腔癌无创诊断提供了重要技术路径。

关键技术包括：1)采用ddPCR对唾液cfDNA进行超灵敏检测；2)匹配33例经病理确诊的OSCC患者唾液与组织样本；3)优化引物探针体系检测TP53 c.215C>G多态性。

【研究结果】

1. 患者特征：84.8%为男性，78.6%有>20年烟草使用史，印证烟草是主要风险因素。
2. 方法优化：成功建立ddPCR检测体系，可区分单碱基差异，灵敏度达0.1%。
3. 多态性分布：发现三种基因型，其中杂合型C/G占比最高，纯合型G/G次之。
4. 验证实验：唾液与组织检测结果一致性达100%，证实方法的可靠性。

【结论与意义】
该研究首次证实ddPCR技术可用于唾液TP53多态性检测，具有三大突破：1)实现完全无创采样，克服组织活检局限；2)检测灵敏度达到0.1%，满足临床需求；3)为口腔癌早期筛查、预后评估提供新工具。特别是对印度等高风险地区，这种低成本、易操作的检测方法具有重要公共卫生价值。研究团队指出，未来可扩大样本量并探索其他基因变异，进一步完善口腔癌分子诊断体系。

（注：全文严格依据原文表述，专业术语如ddPCR(微滴数字PCR)、cfDNA(细胞游离DNA)等均在首次出现时标注英文全称，保留原文基因命名规范如TP53、c.215C>G等格式，作者单位按要求处理为中文名称）