基于质量源于设计(QbD)的环保型RP-HPLC方法开发用于替格瑞洛与阿司匹林的同步定量分析

本研究针对心血管疾病治疗中替格瑞洛(TICA)与阿司匹林(ASP)联合用药缺乏绿色分析方法的问题，采用质量源于设计(AQbD)和响应面法(RSM)优化RP-HPLC条件，建立了一种以乙腈-0.1%三氟乙酸(49:51)为流动相的环保检测方法。验证显示线性范围(TICA 18–135 μg/mL, ASP 15–112.5 μg/mL)、精密度(%RSD<1.5)优异，AGREE评分0.79，为双抗血小板药物的绿色质量控制提供新范式。

　　

心血管疾病(CVD)是全球死亡的首要原因，其中急性冠脉综合征(ACS)和经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后的患者需长期服用替格瑞洛(TICA)与阿司匹林(ASP)的双联抗血小板治疗(DAPT)。然而现有分析方法存在剂量不匹配、环境危害大等问题，且缺乏符合绿色分析化学(GAC)原则的同步检测方案。为此，研究人员开发了一种结合质量源于设计(AQbD)理念的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法，通过系统性优化实现了药物联检的环保化与精准化。

研究采用三因子设计(乙腈比例、流速、柱温)结合响应面法(RSM)，利用Design Expert 13.0软件建立27组实验矩阵。关键创新在于选择0.1%三氟乙酸替代传统缓冲盐，配合PDA检测器在225 nm波长下分析。样本队列包含Sunij Pharma提供的原料药及模拟制剂(含微粉硅胶等辅料)，通过复杂GAPI、AGREE和Analytical Eco-Scale三重绿色评估体系验证。

3.1 流动相与波长选择
通过溶剂筛选发现乙腈-三氟乙酸体系在225 nm处能同时捕获TICA与ASP的特征吸收，克服了甲醇-水体系分离度不足的缺陷。紫外光谱显示两药物在此波长均有强吸收，为方法特异性奠定基础。

3.2 变量影响与模型优化
多项式方程揭示乙腈比例(X₁)对保留时间(R_t)影响最大(系数-0.8694)，流速(X₂)次之。三维响应面显示49%乙腈、1.1 mL/min流速、30°C柱温时分辨率(R_s)达6.76，理论塔板数超5500 plates/meter，尾因子(T)0.96-1.12，实际与预测值误差<3%。

3.3 方法验证
线性验证R²>0.999，检测限(LOD)达0.82 μg/mL(TICA)。加标回收率99.36-100.27%，日内精密度%RSD<1.13。对含90 mg TICA+75 mg ASP的模拟制剂分析显示回收率98.92±0.75%，验证了辅料无干扰。

3.4 绿色度评估
AGREE评分0.79(满分1)，Analytical Eco-Scale得88分(满分100)，GAPI图示显示样本处理与检测环节均为绿色。相比文献方法，本方案减少有机溶剂用量30%，且避免使用磷酸盐缓冲液。

该研究首次将AQbD与GAC整合应用于抗血小板药物分析，通过实验设计(DoE)提升方法稳健性的同时，以三氟乙酸替代高毒性的离子对试剂，符合ICH Q14指南要求。未来可延伸至制剂稳定性研究，为心血管药物质量控制树立了"绿色精准分析"的新标杆。论文的创新性体现在：1) 建立首个符合GAC原则的TICA-ASP同步检测方案；2) 通过RSM模型量化参数交互作用；3) 提供可推广的环保方法开发范式，对推动制药工业可持续发展具有重要意义。