吉西他滨通过p38 MAPK信号通路上调Claudin-3/4促进卵巢癌化疗耐药性的机制研究

本研究针对卵巢癌化疗耐药性这一临床难题，发现吉西他滨（gemcitabine）通过激活p38 MAPK通路转录上调紧密连接蛋白Claudin-3/4（CLDN3/4）的表达，从而增强肿瘤细胞耐药性。研究人员采用A2780卵巢癌细胞模型，结合流式细胞术、qPCR和动物实验，首次揭示CLDN3/4可作为抗体药物偶联物（ADC）的潜在靶点，为联合化疗策略提供新思路。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中最致命的类型之一，化疗耐药性始终是临床治疗的"阿喀琉斯之踵"。尽管吉西他滨等化疗药物被广泛应用，但肿瘤细胞通过动态改变分子特征获得耐药性的机制仍不明朗。值得注意的是，紧密连接蛋白Claudin-3和Claudin-4（CLDN3/4）在卵巢癌中异常高表达，这些四跨膜蛋白不仅参与细胞间连接，更在肿瘤进展中扮演着复杂角色。既往研究发现CLDN4高表达与患者不良预后相关，但化疗药物是否调控这些蛋白的表达尚属未知。合肥综合性国家科学中心健康与医学研究院的研究团队在《The International Journal of Biochemistry》发表的研究，首次揭示了吉西他滨通过分子信号通路调控CLDN3/4表达的新机制。

研究团队主要采用人类卵巢癌细胞系A2780作为模型，通过基因过表达、信号通路抑制剂干预等方法，结合流式细胞术检测蛋白表达、qPCR分析mRNA水平、Western blot验证蛋白变化，并在动物模型中验证发现。此外还利用生物信息学工具分析临床数据关联性。

Gemcitabine上调A2780细胞中CLDN3和CLDN4表达
研究发现吉西他滨处理显著提升A2780细胞中CLDN3和CLDN4的mRNA和蛋白水平。表观遗传学分析显示，这种调控不依赖DNA甲基化或组蛋白乙酰化改变，提示存在转录激活机制。

p38 MAPK介导的转录调控机制
通过信号通路抑制剂筛选，证实p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可完全阻断吉西他滨诱导的CLDN3/4上调。进一步实验表明p38 MAPK通过激活下游转录因子而非影响mRNA稳定性来实现调控。

CLDN3/4过表达赋予化疗保护作用
构建的A2780-CLDN3和A2780-CLDN4稳转株显示，过表达这些蛋白能显著抵抗吉西他滨的细胞杀伤作用，证实其直接参与化疗耐药。

讨论与意义
该研究首次阐明吉西他滨通过p38 MAPK通路激活CLDN3/4转录的分子级联反应，为理解化疗耐药提供了新视角。更具转化价值的是，鉴于CLDN3/4在细胞膜表面的高表达特性，研究建议开发靶向CLDN3/4的抗体药物偶联物（ADC），与常规化疗联用以突破耐药瓶颈。这一策略已在其他CLDN家族成员（如CLDN18.2靶向药Zolbetuximab）的治疗中显现临床潜力。此外，研究揭示的p38 MAPK-CLDN3/4轴可能成为预测化疗响应的生物标志物，为卵巢癌精准治疗开辟新途径。