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为探究大型食肉动物病原体传播情况，研究人员对西班牙坎塔布里亚野生伊比利亚狼开展研究，发现首例犬巴贝斯虫（B. canis）致死病例，且种群中犬肝簇虫（H. canis）、婴儿利什曼原虫（L. infantum）感染率较高，为生态健康监测提供重要数据。
在生态系统中，顶级捕食者作为病原体传播的 “哨兵”，其健康状况对监测自然环境中病原体的流行与传播至关重要。伊比利亚狼（
Canis lupus signatus）作为欧洲狼种群的重要分支，广泛分布于西班牙等地，其食性复杂，与多种野生动物和家畜接触频繁，可能成为多种病原体的携带者和传播者。然而，此前关于伊比利亚狼中媒介传播病原体的研究多集中于单一感染案例或血清学调查，对于共感染情况及其对种群健康的影响尚缺乏深入了解。此外，像犬巴贝斯虫（
Babesia canis）、犬肝簇虫（
Hepatozoon canis）和婴儿利什曼原虫（
Leishmania infantum）等病原体，不仅威胁野生动物健康，部分还具有人畜共患病风险，因此迫切需要明确这些病原体在伊比利亚狼中的流行情况及共感染的潜在影响。
为解决上述问题，来自西班牙相关研究机构的研究人员开展了一项针对坎塔布里亚地区伊比利亚狼的流行病学研究。该研究旨在调查该地区狼种群中媒介传播病原体的感染情况，分析共感染的频率及意义，并首次报道了一例由犬巴贝斯虫引发的致死病例。研究成果发表在《International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife》，为野生动物疾病监测和生态健康评估提供了重要参考。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，对 2016-2022 年间收集的 91 只伊比利亚狼样本（包括死亡个体和合法捕猎个体）进行了全面的尸检、组织病理学分析和分子检测。分子分析中，利用实时定量 PCR（qPCR）和常规 PCR 技术，对脾脏组织中的犬巴贝斯虫、犬肝簇虫、婴儿利什曼原虫等病原体的 DNA 进行检测，并通过测序技术对阳性样本进行物种鉴定和基因分析。此外，还进行了毒理学分析以排除非传染性因素致死的可能，并运用统计方法分析病原体感染与性别、年龄、年份等因素的相关性。
3.1 狼致死病例：犬巴贝斯虫、犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫三重共感染
2022 年 3 月，研究人员在坎塔布里亚发现一只极度虚弱的亚成年雄性伊比利亚狼，其尸体经全面检查后显示，该狼因犬巴贝斯虫感染引发严重溶血性疾病死亡。尸检可见肺充血水肿、肝脾肿大等病变，组织病理学检查发现肺泡内单核细胞浸润、肝细胞空泡变性及脾内犬肝簇虫裂殖体。分子检测证实该狼同时感染犬巴贝斯虫、犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫，毒理学分析排除了中毒可能。这是首次在野生狼中报道犬巴贝斯虫致死病例，表明野生狼对该病原体具有易感性，且共感染可能加剧病情。
3.2 流行病学调查：病原体感染率及共感染情况
对 91 只狼的分子调查显示，犬巴贝斯虫、犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫的个体感染率分别为 6.3%（5/79）、96.3%（78/81）和 23.8%（21/88），未检测到埃立克体属、无形体属和立克次体属病原体。共感染分析发现，最常见的双重共感染为婴儿利什曼原虫与犬肝簇虫（25.6%），三重共感染以犬肝簇虫 + 婴儿利什曼原虫 + 犬血支原体（Mycoplasma haemocanis）为主（6.4%），而致死病例中的三重共感染（犬巴贝斯虫 + 犬肝簇虫 + 婴儿利什曼原虫） prevalence 为 4%。统计分析表明，病原体感染与性别、年龄、年份无显著相关性，但婴儿利什曼原虫与犬血支原体的共感染频率低于随机预期，提示二者可能存在负相互作用。
3.3 统计分析：病原体共发生概率
通过成对共发生分析，发现犬巴贝斯虫、婴儿利什曼原虫和犬血支原体等病原体的共感染概率与随机发生一致，而犬肝簇虫 + 婴儿利什曼原虫 + 犬血支原体的共感染频率显著低于预期，暗示这些病原体之间可能存在竞争或免疫调节等相互作用，影响其共同感染的发生。
4.1 犬巴贝斯虫对野生狼的致病性及共感染影响
本研究首次证实野生狼可因犬巴贝斯虫感染引发致命性溶血性危机，推翻了此前认为野生犬科动物对该病原体具有抗性的观点。共感染的犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫可能通过抑制免疫系统，促使犬巴贝斯虫从隐性感染转为临床发病。尽管后两者在该病例中表现为亚临床感染，但其与犬巴贝斯虫的协同作用值得警惕，提示在野生动物疾病防控中需重视多重病原体的综合影响。
4.2 犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫的高流行及传播风险
犬肝簇虫在坎塔布里亚狼中的感染率高达 96.3%，为目前报道的最高值，表明野生狼可能是该病原体的重要储存宿主。其高流行可能与多种传播途径（如蜱虫媒介、食源性传播）有关。婴儿利什曼原虫作为一种人畜共患病原体，在非流行区的狼种群中被检测到（23.8%），提示其传播范围可能已扩展至传统媒介（白蛉）分布区之外，需警惕通过其他途径（如蜱虫或垂直传播）传播的可能性，这对公共卫生和家畜健康构成潜在威胁。
4.3 狼作为生态健康哨兵的意义
本研究凸显了伊比利亚狼作为 “生态健康哨兵” 的重要性。通过监测其病原体感染情况，可早期发现新兴病原体（如犬巴贝斯虫）的传播和人畜共患病风险（如婴儿利什曼原虫），为评估生态系统中病原体的循环提供关键数据。鉴于气候变化和人兽共居环境的改变可能加剧媒介传播疾病的流行，持续监测狼种群的健康状况对于预测和防控相关疾病至关重要。
本研究首次系统报道了伊比利亚狼中犬巴贝斯虫、犬肝簇虫和婴儿利什曼原虫的感染情况，揭示了野生狼对犬巴贝斯虫的易感性及共感染的潜在危害。研究结果不仅拓展了对野生动物病原体流行病学的认识，也为制定野生动物疾病管理策略和公共卫生防控措施提供了科学依据。未来需进一步研究病原体传播途径、宿主免疫应答及环境驱动因素，以全面评估其对生态系统和人类健康的风险。
