鸡胚绒毛尿囊膜模型作为冷冻消融研究的新型临床前平台：可行性验证与肿瘤治疗评估

为解决肿瘤冷冻消融（cryoablation）临床前研究的高成本与伦理问题，德国马尔堡大学医院团队利用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型，首次评估了该平台对冷冻消融的适用性。研究通过两种冷冻方案（120s/180s）证实胚胎存活率达89%，并成功实现人类神经内分泌肿瘤（BON-1）异种移植模型的完全消融（40%）。该模型为优化冷冻参数及联合疗法提供了高性价比的替代方案，发表于《European Radiology Experimental》。

　　

在肿瘤治疗领域，冷冻消融技术因其精准靶向和微创特性，已成为肾癌、前列腺癌等实体瘤的重要治疗手段。然而，传统动物模型的高成本和伦理争议制约了新型冷冻方案的开发。如何找到既能模拟生物微环境又符合伦理要求的替代平台？德国马尔堡大学医院联合多学科团队将目光投向了鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）——这个富含血管的胚胎结构此前已成功用于射频消融研究，但冷冻消融的可行性仍是空白。

研究人员设计了两阶段实验：首先测试胚胎对冷冻的耐受性，采用两种冷冻方案（120s-120s-120s和180s-120s-180s），通过热成像仪监测温度变化；随后将人类神经内分泌肿瘤细胞BON-1移植至CAM，评估肿瘤消融效果。关键技术包括：1）ED₁₂（胚胎第12天）冷冻操作；2）Galil Medical Cryohit系统配合ICESeed 1.5探针；3）立体显微镜与HE/Ki-67染色进行组织学分析；4）17例异种移植模型构建。

胚胎存活率与温度分布
两种方案均实现89%的胚胎存活率（8/9）。热成像显示180s方案外周降温更显著（6.7±1.0°C vs 4.5±0.9°C），但所有胚胎均耐受。侧视图像证实冷冻效应集中于探针尖端，符合临床治疗所需的局部作用特性。

肿瘤消融效果
在6例120s方案中，2例实现完全消融，2例残留零星Ki-67阳性细胞；180s方案的5例中，完全消融率提升至40%，但仍有1例存在肿瘤团块。组织学观察到典型冷冻损伤特征：出血、血栓形成及白细胞浸润。值得注意的是，残留肿瘤多因探针定位偏差导致，提示技术优化空间。

这项研究首次证实CAM模型能有效模拟冷冻消融的生物学效应，其高存活率与可重复性为后续研究奠定基础。尽管存在物种差异，但该平台特别适合快速筛选冷冻参数（如循环次数、温度梯度）及测试联合疗法（如免疫佐剂）。作者建议未来可延长观察周期以评估延迟性细胞死亡，并通过改进探针定位提升消融完整性。作为替代哺乳动物模型的创新尝试，CAM系统有望加速冷冻技术的临床转化，同时响应欧盟动物实验3R原则（替代、减少、优化）。