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为探讨 CRNDE 与骨折延迟愈合（DFH）的关联及机制，研究人员检测血清和细胞中 CRNDE、miR-29a-3p 表达，构建 hFOB 1.19 成骨分化模型。发现 DFH 患者 CRNDE 下调、miR-29a-3p 上调，CRNDE 可诊断预测 DFH，其通过吸附 miR-29a-3p 改善骨折愈合。
骨折愈合是一个复杂的生理过程，尽管现代医学在手术技术和材料上取得了显著进步，但仍有 5%-20% 的骨折患者会出现术后延迟愈合或不愈合的情况，这不仅增加了患者的痛苦和经济负担，还可能导致残疾甚至死亡。胫骨骨折作为常见的骨折类型，其延迟愈合（delayed fracture healing, DFH）问题尤为突出。目前，虽然细胞治疗、骨移植材料、组织工程等技术在骨折愈合领域展现出一定潜力，但寻找更有效的生物标志物和治疗靶点仍迫在眉睫。非编码 RNA，尤其是长链非编码 RNA（long non-coding RNA, lncRNA）和微小 RNA（microRNA, miRNA），在骨骼疾病中的调控作用近年来备受关注，它们可能成为揭示骨折愈合机制的关键突破口。
在这样的背景下，黑龙江中医药大学附属第一医院、南京中医药大学附属江苏省中医院等机构的研究人员开展了关于 lncRNA CRNDE 在骨折延迟愈合中作用的研究。该研究成果发表在《Journal of Orthopaedic Surgery and Research》上，为骨折延迟愈合的诊断和治疗提供了新的思路和靶点。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：选取 2022-2024 年在南京中医药大学附属江苏省中医院接受手术的 197 例胫骨骨折患者，分为正常骨折愈合（NFH）组 101 例和骨折延迟愈合（DFH）组 96 例，收集血清标本；培养人成骨细胞系 hFOB 1.19 并诱导成骨分化，构建细胞模型；运用 qRT-PCR 技术检测血清和细胞中 CRNDE、miR-29a-3p 及成骨分化相关基因（如 OCN、OPN、OSX、Runx2）的表达；采用 CCK-8 法检测细胞增殖活性，流式细胞术分析细胞凋亡；通过双荧光素酶报告基因实验验证 CRNDE 与 miR-29a-3p 的靶向结合关系。
血清 CRNDE 的诊断与预测价值
qRT-PCR 结果显示，DFH 组患者血清 CRNDE 表达显著低于 NFH 组。ROC 分析表明，血清 CRNDE 对 DFH 具有良好的诊断能力，曲线下面积（AUC）为 0.90，灵敏度为 93.75%，特异度为 70.30%。 logistic 回归分析进一步证实，血清 CRNDE 低表达和糖尿病史是 DFH 发生的独立危险因素，提示 CRNDE 可作为 DFH 诊断和预测的生物标志物。
CRNDE 对成骨分化的调控作用
在 hFOB 1.19 成骨分化模型中，随着诱导时间延长，CRNDE 及成骨分化标志物（ALP、OCN、OPN 等）的表达呈时间依赖性增加，成功构建成骨分化模型。沉默 CRNDE 后，细胞中 CRNDE 表达显著降低，ALP 活性及 OCN、OPN、OSX、Runx2 等基因表达均明显下降，同时细胞增殖活性减弱，凋亡率显著升高，表明 CRNDE 对成骨细胞的增殖和分化具有重要调控作用。
CRNDE 与 miR-29a-3p 的相互作用
在线数据库预测显示 CRNDE 与 miR-29a-3p 存在结合位点。qRT-PCR 结果显示，DFH 患者血清 miR-29a-3p 表达显著高于 NFH 组，且两者呈负相关。双荧光素酶报告基因实验证实，miR-29a-3p 可直接靶向结合 CRNDE 的 3'UTR 区域，抑制其荧光素酶活性，表明两者存在负调控关系。进一步研究发现，同时抑制 CRNDE 和 miR-29a-3p 可显著恢复成骨分化标志物的表达，逆转 CRNDE 沉默导致的细胞增殖抑制和凋亡增加，提示 CRNDE 通过海绵吸附 miR-29a-3p 来调控成骨细胞功能。
研究结论与意义
本研究表明，血清 CRNDE 可作为骨折延迟愈合（DFH）的潜在诊断和预测生物标志物。CRNDE 通过靶向吸附 miR-29a-3p，解除 miR-29a-3p 对成骨细胞增殖和分化的抑制作用，从而促进骨折愈合。该研究不仅揭示了 CRNDE/miR-29a-3p 轴在骨折愈合中的重要调控机制，为 DFH 的早期诊断和预后评估提供了新的生物标志物，也为开发基于非编码 RNA 的骨折治疗新策略提供了实验依据。尽管研究未建立 DFH 动物模型，且未全面验证 CRNDE 的所有预测靶标，但该发现为深入探索骨折愈合的分子机制和临床转化奠定了基础，有望推动骨折治疗从传统手段向精准分子靶向治疗的转变。
