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传统光度法测定半乳糖醛酸（GalA）存在重复性低、灵敏度有限等问题。研究人员开发基于 LC-MS 的方法，将 GalA 降解为 5 - 甲酰基 - 2 - 呋喃甲酸（5FFA），用13C6-GalA 作内标定量。该法更灵敏精准，为果胶分析提供新选择。
在食品与制药领域，果胶作为重要的植物细胞壁多糖，其核心组分半乳糖醛酸（GalA）的含量测定至关重要。传统的光度法，如咔唑法、3 - 苯基苯酚法等，虽被广泛使用，但存在诸多缺陷：反应机制不明导致条件依赖性强，微量干扰物质易引发结果偏差，且灵敏度不足，难以精准量化复杂样品中的 GalA。尤其是当分析可溶性膳食纤维（SDF）和不可溶性膳食纤维（IDF）时，不同方法常得出差异显著的结果，这使得建立一种可靠、高效的检测方法成为行业迫切需求。
为解决上述难题，德国研究人员开展了相关研究，其成果发表在《Carbohydrate Polymers》。研究团队开发了一种基于超高效液相色谱 - 电喷雾质谱（UHPLC-ESI-MS）的稳定同位素稀释法，旨在实现含果胶样品中总 GalA 的精准定量。
研究采用的关键技术方法包括：
- 酸降解法：在优化的浓硫酸条件下，将 GalA 降解为特征产物 5 - 甲酰基 - 2 - 呋喃甲酸（5FFA）；
- 同位素内标法：引入13C6-GalA 作为内标，校正降解和提取过程中的误差；
- 质谱定量：通过单离子监测（SIM）技术对 5FFA 及其同位素标记产物进行检测。
1. 方法验证与特异性评估
研究首先对不同聚合度（DP）的均聚半乳糖醛酸（HG）寡糖标准品进行分析，发现该方法的回收率在 95%-105% 之间，相对标准偏差（RSD）小于 3%，表明其具有良好的准确性和精密度。通过对比 GalA 与其他尿苷酸（如葡萄糖醛酸 GlcA、甘露糖醛酸 ManA）的降解产物，证实 5FFA 为 GalA 的特异性标志物，避免了其他糖类的干扰。
2. 实际样品分析
将该方法应用于胡萝卜、苹果、柑橘果肉等植物源膳食纤维样品，结果显示：可溶性膳食纤维中的 GalA 含量可通过直接酸降解测定，而不可溶性膳食纤维需先经预处理释放结合态 GalA。与常用的比色法（如咔唑 - 硫酸法）对比发现，两者在分析不溶性纤维时结果相近，但在可溶性纤维样品中差异显著，凸显了 LC-MS 法在复杂基质中的优势。
3. 方法优势与应用潜力
该方法突破了传统光度法的局限：
- 灵敏度高：检测限低至 0.1 μg/mL，适用于微量样品分析；
- 特异性强：通过质谱碎片离子特征排除干扰，尤其适合含多种糖类的复杂体系；
- 适用性广：可同时分析可溶性与不可溶性膳食纤维中的 GalA，满足食品质量控制、植物细胞壁结构研究等多场景需求。
研究结论表明，基于 LC-MS 的稳定同位素稀释法为 GalA 的定量分析提供了一种可靠的替代方案。其通过同位素内标校正和质谱特异性检测，显著提升了分析的准确性和抗干扰能力，尤其解决了传统方法在可溶性纤维测定中的局限性。该方法不仅有助于食品工业中果胶添加剂（如 E440）的质量监控，确保其符合 “尿苷酸含量≥65%” 的法规要求，还为植物细胞壁多糖的结构解析提供了新工具，推动了膳食纤维功能研究的发展。未来，该技术有望在医药领域（如果胶基药物载体的成分分析）拓展应用，为多糖类物质的精准分析奠定基础。
