靶向CIDEB的GalNAc-siRNA疗法：缓解小鼠MASH模型中肝脏脂肪变性和纤维化的创新策略

这篇研究开发了新型GalNAc偶联的siRNA（GalNAc-siCIDEB），通过特异性沉默肝脏中细胞死亡诱导DNA片段化因子α样效应蛋白B（CIDEB），在HFD-DIO和CDAHFD两种小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）模型中显著改善肝脏脂肪变性、炎症和纤维化。该siRNA展现出强效持久的基因沉默效果（IC50低至0.056 nM）和优异的安全性，为基于遗传证据（CIDEB功能缺失突变可降低54%肝病风险）的MASH精准治疗提供了新策略。

　　

筛选靶向CIDEB的高效siRNA
研究团队针对人类CIDEB基因（NM_001393338.1）设计55条siRNA序列，通过2′-O-甲基（2′-OMe）、2′-氟（2′-F）和5′-乙烯基膦酸酯（5′-VP）化学修饰增强稳定性。在Hep3B细胞中筛选出15条可降低90%以上CIDEB mRNA的候选序列，进一步引入热不稳定核苷酸和异甘油核酸（isoGNA）修饰提升特异性。其中GalNAc-siCIDEB（5-374）在跨物种实验中表现突出，对Hep3B细胞、原代小鼠和原代大鼠肝细胞的IC₅₀分别为0.056 nM、0.158 nM和0.735 nM。

精准递送与安全性验证
GalNAc修饰通过去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）实现肝靶向递送。RNA-seq分析显示，GalNAc-siCIDEB在原发性大鼠肝细胞中仅引起5个非靶基因（如Fah、Egr1）表达下调>50%，而人类原代肝细胞中未观察到显著脱靶效应。大鼠重复给药实验（100 mg/kg，间隔30天×3次）证实其安全性：血清ALT/AST/ALP等肝肾功能指标、组织病理学检查均未见异常，且不影响体重和进食量。

MASH模型的治疗突破
在高脂饮食诱导肥胖（HFD-DIO）模型中，10 mg/kg剂量治疗92天使肝脏指数降低29%，血清ALT下降62%，肝组织H&E染色显示脂肪变性显著改善。在胆碱缺乏高脂饮食（CDAHFD）模型中，单次3 mg/kg剂量即可使天冬氨酸氨基转移酶（AST）降低51%，天冬氨酸氨基转移酶（ALT）降低47%。Picro Sirius红染色显示纤维化面积减少82%，同时脂肪合成关键基因Fasn和纤维化标志物Col1a1表达分别下调68%和73%。

机制与临床价值
CIDEB作为CIDE家族成员，通过调控肝细胞脂滴融合促进脂肪蓄积。该研究首次证实模拟人类CIDEB功能缺失突变的基因沉默策略可同时改善MASH三大病理特征：通过Western blot检测到CIDEB蛋白水平降低>90%，伴随脂质代谢相关基因表达谱改变。相较于FDA批准的首个MASH药物resmetirom（THRβ激动剂），GalNAc-siCIDEB具有肝靶向性强、作用持久（单次给药维持效果>1个月）和避免全身性副作用（如甲状腺功能紊乱）的优势。

未来展望
研究者建议探索与PCSK9抑制剂等降脂药物的联合治疗方案，以协同改善肝脏和全身脂质代谢。该成果为基于人类遗传学证据的RNAi疗法开发提供了范式，其设计策略（如isoGNA修饰增强特异性）可拓展至其他肝脏靶点。