利妥昔单抗改善关节炎小鼠体细胞DNA损伤与修复效率的机制研究及其临床意义

本研究针对类风湿性关节炎(RA)患者癌症风险升高的问题，探讨了生物制剂利妥昔单抗(RTX)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠模型DNA损伤修复的影响。通过彗星实验、氧化应激检测及PCR Array等技术，发现RTX能显著降低氧化性DNA损伤、加速修复速率，并恢复DNA修复基因表达。该研究为RTX作为非基因毒性药物治疗RA提供了重要理论依据。

　　

类风湿性关节炎(RA)是一种以关节破坏为特征的自身免疫性疾病，全球患病率达1-2%。更令人担忧的是，RA患者罹患淋巴瘤等恶性肿瘤的风险较普通人群高1.5-3倍。这种癌症易感性究竟源于疾病本身还是治疗药物？慢性炎症导致的氧化应激和DNA损伤修复缺陷可能是关键因素。在此背景下，King Saud University的研究团队在《Electronic Journal of Biotechnology》发表重要成果，首次系统评估了B细胞耗竭疗法代表药物利妥昔单抗(RTX)对关节炎模型DNA稳定性的影响。

研究采用DBA/1J小鼠建立胶原诱导关节炎(CIA)模型，通过彗星实验检测DNA链断裂，结合Fpg/Endo III酶修饰法分析氧化损伤；利用γ射线辐射诱导损伤后动态监测修复效率；采用RT² Profiler PCR Array检测84个DNA修复基因表达谱，并通过Western blot验证关键蛋白表达。

3.1 RTX改善关节炎症状与关节病理
研究发现RTX治疗显著降低CIA小鼠关节肿胀评分（p<0.01），组织学显示其能有效抑制滑膜增生和骨侵蚀。这为RTX的临床疗效提供了动物模型证据。

3.2 RTX抑制DNA链断裂
彗星实验显示CIA小鼠自发DNA损伤（尾矩增加）较对照组高2.1倍（p<0.01），而RTX治疗使损伤水平降低46%。阳性对照环磷酰胺验证了检测敏感性。

3.3 氧化性DNA损伤的改善
Fpg/Endo III酶处理揭示CIA小鼠氧化碱基损伤增加5.8-13.6倍（p<0.01），RTX治疗使嘌呤/嘧啶氧化损伤分别降低57%和63%。

3.4 DNA修复能力增强
4Gy γ射线照射后，CIA小鼠修复速率较正常慢1.8倍（p<0.01）。RTX治疗使修复效率提升至接近正常水平，120分钟时修复率达55%。

3.5 氧化还原平衡调节
RTX使CIA小鼠ROS生成降低2.3倍（p<0.05），同时恢复谷胱甘肽(GSH)水平至正常范围，表明其抗氧化作用。

3.6-3.7 DNA修复通路调控
PCR Array显示CIA小鼠13个修复基因异常表达：Ogg1（+10.5倍）、Parp1（+13.6倍）等上调，而Rad50（-63%）、Xrcc1（-77%）等下调（均p<0.01）。Western blot证实RTX可逆转这些蛋白异常表达。

这项研究首次阐明：1）慢性关节炎通过氧化应激导致DNA修复系统紊乱；2）RTX通过双重机制发挥作用——既降低氧化损伤，又恢复修复基因表达；3）长期RTX治疗不会诱发基因毒性。该发现为RA治疗策略提供了重要启示：B细胞靶向治疗不仅能控制炎症，还可能降低患者的癌症风险。研究结果支持将RTX作为安全的疾病修饰抗风湿药(DMARD)用于临床，并为开发新型DNA保护型生物制剂提供了理论框架。特别值得注意的是，RTX对Rad50/Mre11a复合物的调控作用，可能为理解RA相关淋巴瘤的分子机制开辟了新视角。