小鼠神经元高尔基相关膜细胞器的微管成核机制研究

【字体: 时间:2025年05月29日 来源:Histochemistry and Cell Biology 2.1

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  在分化细胞中,微管常于非中心体位点成核。为明确培养的小鼠皮层神经元胞质内微管成核的细胞器位点,研究人员开展相关研究,发现 Syntaxin 6 标记的高尔基体卫星(Golgi satellites)是微管成核位点,其或引导树突粗面内质网产生的运输囊泡。

  
在某些分化细胞类型中,微管(Microtubules)常于非中心体位点成核。此前研究表明,培养的小鼠皮层神经元中微管可在胞质内成核,但成核的细胞器位点尚不明确。本研究探讨了一种新近发现的神经元特异性高尔基样结构 —— 高尔基体卫星(Golgi satellites)作为成核位点的可能性。通过诺考达唑(Nocodazole)解聚后观察微管再生来检测微管成核。首先,研究人员探究了微管成核与膜细胞器的空间关联,检测了包括 GM130(顺面高尔基体和高尔基体前哨标记)、Golgin97(反面高尔基体网络标记)、转铁蛋白受体(Transferrin receptor,循环内体标记)、TOMM40(线粒体标记)和 Syntaxin 6(早期内体和高尔基体卫星标记)等细胞器标记物。结果显示,在 TOMM40 阳性和 Syntaxin 6 阳性细胞器丰富的胞质区域观察到微管再生。三重免疫染色表明,再生微管一端的 γ- 微管蛋白(γ-tubulin)附着于 Syntaxin 6 标记的细胞器,而非 TOMM40 标记的细胞器,提示 Syntaxin 6 标记的细胞器为微管成核位点。为进一步验证成核的 Syntaxin 6 标记细胞器是否为高尔基体卫星,研究人员将携带 FLAG 标记的 Golt 序列(高尔基体卫星标记)的质粒载体转染至神经元,并进行微管再生实验,发现树突内 FLAG 阳性细胞器上存在再生微管。该观察表明高尔基体卫星是微管成核位点,来自高尔基体卫星的微管可能引导树突粗面内质网产生的运输囊泡。

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