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该综述聚焦 Zika 病毒（ZIKV）防治难题，探讨内源性微小 RNA（miRNA）作为抗病毒策略的潜力。通过计算算法筛选关键 miRNA，发现其可显著抑制病毒细胞病变效应，结合药物再利用平台筛选出黄连素、泼尼松龙、四环素等调控化合物，为 RNA 病毒治疗提供新方向。
研究背景与目标
Zika 病毒（ZIKV）作为黄病毒科黄病毒属的单股正链 RNA 病毒，主要通过埃及伊蚊传播，还可经性接触和围产期传播。其感染多数无症状，但孕妇感染可致先天性 Zika 综合征（CZS），且目前无获批疫苗或抗病毒药物。微小 RNA（miRNA）是约 22 核苷酸的非编码 RNA，可通过靶向病毒 RNA 调控基因表达，有潜力成为抗病毒剂。本研究探索内源性 miRNA 调控作为抗 ZIKV 策略，旨在通过计算算法识别关键 miRNA 并利用药物再利用增强其表达，为病毒治疗开辟新途径。
关键研究方法与结果
miRNA 靶向 ZIKV 基因组的预测与验证
使用 PITA 靶预测算法在 ZIKV 基因组中搜索人类内源性 miRNA 候选，基于靶位点可及性、相互作用自由能和热稳定性评分，从 2589 个成熟 miRNA 中筛选出与病毒基因组不同编码区互补的候选，如 hsa-miR-4722-5p、hsa-miR-939-3p 等。在 VERO 细胞中过表达这些 miRNA，发现 12 种 miRNA 可使巴西 ZIKV 株感染细胞的细胞病变效应减少超 50%，显示出抗病毒潜力。
调控内源性 miRNA 的药物筛选
利用 METACORE 平台分析调控 miRNA 表达的药物，发现黄连素、泼尼松龙、四环素可通过调控相关蛋白激活通路来增强 miRNA 表达。例如，黄连素通过激活芳香烃受体（AHR）通路调控 hsa-miR-4722-5p、hsa-miR-939-3p 等；泼尼松龙通过糖皮质激素受体（GCR）通路影响 hsa-miR-4722-5p 等；四环素通过调控 PXR/RXR-α-coREST 复合物 / LSD1 通路作用于 hsa-miR-4786-3p。
药物抗病毒活性评估
体外实验显示，三种药物均能显著降低 ZIKV 病毒滴度。黄连素在 MCF7 细胞中浓度为 10-40μM 时可 100% 抑制病毒；泼尼松龙在 HT1080 细胞中使病毒滴度减少超 90%；四环素在 A549 细胞中病毒滴度降低约 90%。qPCR 验证显示，药物处理后相关 miRNA 表达显著上调，如黄连素诱导 hsa-miR-939-3p 等表达增加 18-60 倍。
内源性 miRNA 作用机制验证
通过建立表达抗 miR 的细胞系（miRNA 海绵），发现抑制靶向 ZIKV 的 miRNA 可使病毒感染恢复。例如，抑制 hsa-miR-4786-3p 使四环素处理的 A549 细胞病毒感染恢复约 40%，证实了 miRNA 在药物抗病毒效应中的关键作用。
讨论与展望
本研究结合计算和体外实验，证明内源性 miRNA 调控是有效的抗 ZIKV 策略，黄连素等药物通过上调特定 miRNA 抑制病毒复制。与合成 miRNA 疗法相比，该方法更接近生理调控，可规避稳定性和毒性问题。尽管药物在孕妇中应用受限，但其在其他 ZIKV 相关疾病如男性不育和吉兰 - 巴雷综合征中具有潜力。未来需进一步通过 RNA 测序和体内实验验证安全性，为 miRNA 基疗法在其他 RNA 病毒感染中的应用提供借鉴。研究为理解 miRNA 与病毒相互作用及开发新型抗病毒药物奠定了基础。
