N-糖基化LTBR通过阻断RORC泛素化和FOXP3转录提高肝癌中Th17/Treg细胞比例

为解决LTBR在CD4+ T细胞分化中的作用机制问题，福建医科大学团队开展LTBR调控Th17/Treg细胞比例的研究，发现N-糖基化LTBR通过抑制PELI1介导的TRAF3降解和PRDM1启动的Foxp3转录，提高Th17/Treg比例并抑制肝癌进展。该研究为联合糖酵解抑制剂的免疫治疗提供新靶点，发表于《Cell Death and Disease》。

　　

在肿瘤免疫治疗领域，CD4⁺ T细胞亚群Th17和调节性T细胞(Treg)的动态平衡对肿瘤进展具有双重调控作用。尽管LTBR（淋巴毒素β受体）在CAR-T细胞治疗实体瘤中展现出抗耗竭和增殖优势，但其如何通过调控Th17/Treg比例影响肝癌免疫微环境仍是未解之谜。福建医科大学的研究团队通过多组学分析和基因编辑技术，揭示了LTBR通过独特的"双轨制"机制——既稳定Th17关键转录因子RORC又抑制Treg标志物FOXP3——重塑肿瘤免疫景观的重要发现，相关成果发表在《Cell Death and Disease》。

研究采用患者来源异种移植(PDOX)模型和条件性基因敲入/敲除技术，结合质谱分析、染色质免疫沉淀(ChIP-qPCR)和分子对接等关键技术。通过分析公共数据集GSE193736和单细胞测序数据，发现LTBR过表达显著改变CD4⁺ T细胞的染色质可及性和蛋白泛素化模式。

【LTBR提高Th17/Treg比例抑制肝癌生长】
条件性敲入Ltbr的CD4⁺ T细胞使荷瘤小鼠肿瘤体积缩小60%，生存期延长。质谱流式分析揭示13个T细胞亚群变化，其中BATF⁺ Th17细胞增加3倍而CD127⁺ Treg减少50%。值得注意的是，LTBR使RORC蛋白（非mRNA）水平提升2.1倍，同时FOXP3转录降低70%。

【LTBR通过抑制PELI1稳定TRAF3蛋白】
机制研究发现LTBR下调E3泛素连接酶PELI1表达，使TRAF3半衰期从2小时延长至5小时。PELI1通过RING样结构域与TRAF3的MATH域结合，催化TRAF3第368位赖氨酸发生K48连接型泛素化降解。在原发性肝癌模型中，Th17特异性Peli1敲除完全逆转了LTBR的抗肿瘤效应。

【TRAF3与RORC竞争性结合SMURF1】
蛋白质互作网络分析发现，TRAF3和RORC共同竞争HECT型泛素连接酶SMURF1的催化结构域。过表达TRAF3使RORC蛋白稳定性提高2.3倍，特异性阻断SMURF1对RORC第90/277/467位赖氨酸的K48泛素化修饰。这种"底物竞争性保护"机制在泛素化调控中尚属首次报道。

【LTBR抑制PRDM1启动的Foxp3转录】
在Treg细胞中，LTBR使转录因子PRDM1表达降低65%，通过缺失Foxp3启动子区CTACTTTCTCTTCCTC序列证实其直接调控作用。Prdm1条件性敲除小鼠的肿瘤浸润Treg比例下降40%，与临床肝癌组织RNA-seq数据高度一致。

【N-糖基化维持LTBR稳定性】
代谢调控研究发现，肝癌细胞糖酵解消耗微环境葡萄糖会抑制LTBR第40位天冬酰胺的N-糖基化。去糖基化LTBR易被K48泛素化降解，而FDA批准的糖酵解抑制剂Alkannin（PKM2抑制剂）与LTBR过表达T细胞联用，使PDOX模型肿瘤体积缩小78%，Th17/Treg比例提高4.5倍。

这项研究不仅阐明LTBR通过"泛素化-转录"双途径调控T细胞分化的新机制，更提出"代谢-免疫"协同治疗策略。值得注意的是，TRAF3与RORC竞争SMURF1的发现为泛素化调控提供全新范式，而N-糖基化依赖的LTBR稳定性解释为何糖酵解抑制剂能增强免疫治疗效果。尽管存在基因编辑安全性和患者异质性的临床转化挑战，该研究为肝癌免疫治疗提供具有转化潜力的组合靶点。正如通讯作者Nanhong Tang强调的，这项发现可能改变目前基于PD-1/PD-L1的单一免疫治疗格局，为"代谢重编程+免疫调节"的联合疗法奠定理论基础。